Anticorpo Monoclonal Anti-Neurofilamento H para WB, IP, ELISA - P12036

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Neurofilamento H (NFH)

• O Neurofilamento H (NFH), também conhecido como proteína de neurofilamento de 200 kDa ou proteína H do tripé de neurofilamentos, é um componente polipeptídico pesado dos filamentos intermediários neuronais.
• O NFH é essencial para a manutenção do calibre neuronal e desempenha um papel crítico em axônios maduros que não é compensado pelas proteínas de neurofilamento menores NEFL e NEFM.
• Ele pode cooperar com outras proteínas de filamentos intermediários neuronais, como a peripherina (PRPH) e a internexina (INA), para formar redes filamentosas em neurônios (Por similaridade).
• A proteína se localiza no citoplasma, particularmente no citoesqueleto dos axônios, onde contribui para a integridade estrutural e o transporte axonal.
• O NFH sofre extensa fosforilação pós-traducional, que acredita-se regular a montagem dos filamentos e as interações com outros elementos do citoesqueleto.
• O splicing alternativo do gene NEFH produz múltiplas isoformas, potencialmente modulando sua função.
• Variantes genéticas no gene NEFH estão associadas a doenças neurodegenerativas, incluindo a esclerose lateral amiotrófica (ELA) e a doença de Charcot-Marie-Tooth tipo 2CC (CMT2CC), destacando sua relevância clínica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 550–650 do Neurofilamento H humano, uma região que pode ser conservada entre espécies (com base nos dados de reatividade cruzada), sugerindo um epítopo antigênico robusto.
• Para Western Blot (WB), espere uma banda de aproximadamente 112 kDa; recomenda-se a otimização das condições de preparação de amostra e detecção usando lisados de células neuronais ou tecidos apropriados.
• Em aplicações de imunoprecipitação (IP), a pré-limpeza e a titulação do anticorpo podem melhorar a especificidade; a detecção subsequente por WB pode confirmar o alvo.
• O ELISA pode ser empregado para detecção quantitativa; use proteína purificada ou peptídeo como controle e valide na matriz biológica relevante.
• Devido ao potencial de modificações pós-traducionais (por exemplo, fosforilação), considere usar inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra para preservar o estado endógeno.
• A reatividade cruzada com o Neurofilamento H de camundongo e rato é indicada, permitindo o uso em modelos de roedores; não obstante, recomenda-se o alinhamento da sequência da região do epítopo na espécie alvo.

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