Anticorpo Monoclonal Anti-Neuropilina-1 (NRP1) para WB, IF/ICC, ELISA - O14786

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Neuropilina-1 (NRP1)

• A Neuropilina-1 (NRP1), também conhecida como receptor do fator de crescimento endotelial vascular 165 (VEGF165R) e CD304, é um receptor glicoproteico transmembranar de passagem única com peso molecular previsto de aproximadamente 103 kDa. Pertence à família das neuropilinas e funciona como coreceptor para semaforinas e membros da família VEGF.
• Ela medeia a atividade quimiorepulsiva das semaforinas, especialmente a SEMA3A, e se liga a VEGF165, PLGF-2 e VEGFB para regular a angiogênese e o desenvolvimento cardiovascular. O reconhecimento do motivo C-terminal CendR (R/KXXR/K) nos ligantes desencadeia a internalização celular e o extravasamento vascular. Referências relacionadas: PMID:10688880, PMID:9288753, PMID:9529250, PMID:19805273
• A NRP1 é crucial para o desenvolvimento do sistema nervoso, guiando o encontro do caminho dos axônios motores e a migração neuronal, incluindo a migração caudal dos neurônios motores faciais durante a embriogênese.
• A proteína se localiza na membrana celular, citoplasma e membrana mitocondrial, e também pode ser secretada. Ela sofre splicing alternativo, produzindo isoformas com padrões de expressão distintos.
• As modificações pós-traducionais incluem N-glicosilação, formação de pontes dissulfeto e fosforilação. Ela também contém domínios de ligação a heparan sulfato/heparina, contribuindo para seu papel como coreceptor de proteoglicano.
• Em tecidos humanos, a NRP1 é altamente expressa no coração e na placenta, moderadamente no pulmão, fígado, músculo esquelético, rim e pâncreas, e em níveis baixos no cérebro adulto. Também é expressa no epitélio olfativo e em fibroblastos.
• A NRP1 atua como fator hospedeiro para a infecção por SARS-CoV-2, ao se ligar ao motivo CendR RRAR na proteína spike, facilitando a entrada viral.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting (WB), considere usar lisados de células inteiras de tecidos que expressam NRP1, como coração ou placenta, ou de linhas celulares transfectadas. Observe que a proteína pode aparecer como múltiplas bandas devido à glicosilação e ao splicing alternativo; o peso não modificado previsto é de ~103 kDa, com bandas observadas em torno de 68–103 kDa relatadas na literatura.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), a NRP1 é principalmente localizada na membrana. Valide as condições de fixação e permeabilização no seu sistema celular específico, pois a permeabilização excessiva pode alterar a distribuição do sinal.
• Para ELISA, este anticorpo, que reconhece o domínio extracelular (aa 22-644), pode ser usado para captura ou detecção em imunoensaios sanduíche. Combine com um anticorpo de detecção contra um epítopo diferente ou use como anticorpo de detecção em combinação com um anticorpo de captura; faça a titulação para otimizar a relação sinal-ruído de fundo.
• Dado que o imunógeno abrange quase toda a região extracelular, o anticorpo pode reconhecer múltiplas isoformas de NRP1. A reatividade cruzada com outras espécies não é garantida; valide se necessário.

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