Anticorpo Monoclonal Anti-Elastase de Neutrófilo (ELANE) para WB, IP, ELISA - P08246

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Elastase de Neutrófilo (ELANE)

• A elastase de neutrófilo (ELANE), também conhecida como serina protease da medula óssea, elastase-2, elastase de leucócitos humanos (HLE), medullasin e elastase PMN, é uma serina protease codificada pelo gene ELANE.

• Modifica as funções das células natural killer, monócitos e granulócitos. Referências relacionadas: PMID:15140022

• Exibe atividade microbicida ao clivar proteínas bacterianas; digere a proteína de membrana externa A (ompA) em E. coli e K. pneumoniae, contribuindo para a morte dessas bactérias in vitro. Referências relacionadas: PMID:10947984, PMID:25161283

• Crítica para a formação de armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs) ao translocar para o núcleo, degradar a histona H4 e facilitar a descondensação da cromatina. As NETs prendem patógenos durante a inflamação. Referências relacionadas: PMID:20974816, PMID:25066128, PMID:28574339

• Inibe a libertação de enzimas de neutrófilos dependente de C5a e a quimiotaxia. Referências relacionadas: PMID:15140022

• Promove a coagulação sanguínea e a agregação plaquetária ao clivar o inibidor da via do fator tecidual (TFPI) e ativar a integrina alfa-IIb/beta-3. Referências relacionadas: PMID:20676107, PMID:25211214, PMID:9111081

• Cliva GSDMB, inibindo a piroptose. Referências relacionadas: PMID:36899106

• Localizada subcelularmente em vesículas citoplasmáticas, fagossomas, lisossomas, grânulos citolíticos e no núcleo. Expressão específica do tecido em células da medula óssea e neutrófilos. Referências relacionadas: PMID:10947984

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo sintético do domínio catalítico (aa 167-267), sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece a forma ativa madura da ELANE. Valide a especificidade usando proteína recombinante ou lisados celulares que expressem ELANE ativa.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de ~29 kDa; note que o zimogénio não processado pode aparecer com um peso molecular mais alto. Confirme a identidade da banda com controlos apropriados.
• Em experimentos de imunoprecipitação (IP), considere a potencial preferência do anticorpo pela forma ativa da enzima, o que é relevante para estudar interações e complexos da protease.
• Para aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou deteção. Considere o emparelhamento com outro anticorpo específico para ELANE para o desenvolvimento de ELISA sanduíche.
• Dada a atividade proteolítica da ELANE, evite incubações prolongadas a 37°C sem inibidores de protease para evitar a autodegradação e a potencial perda de sinal.
• A reatividade cruzada é reportada apenas para humano; teste a reatividade noutras espécies se necessário para o seu modelo experimental.

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