Anticorpo Monoclonal Anti-NF-kB p65/RelA (Validado por KO) para WB, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - Q04206

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA é uma subunidade do complexo do fator de transcrição NF-kB, que existe como homo ou heterodímeros; o heterodímero com NFKB1 é a forma mais abundante e atua como ativador transcricional.
• Desempenha um papel central na inflamação, imunidade, diferenciação, crescimento celular, tumorigênese e apoptose através da regulação da expressão de genes alvo.
• A ativação de NF-kB envolve a fosforilação e degradação dos inibidores I-kB, levando à liberação e translocação nuclear do complexo ativo p65/RelA.
• Essencial para a expressão de genes de citocinas em células T. Referências relacionadas: PMID:15790681
• Fator de transcrição chave que regula a resposta interferon durante a infecção por SARS-CoV-2. Referências relacionadas: PMID:33440148
• Associa-se à cromatina nas regiões promotoras de NF-kB através da interação com DDX1, modulando a acessibilidade do promotor.
• Está sujeito a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação, metilação e ubiquitinação, que ajustam sua atividade.
• Predominantemente citoplasmático em células em repouso, transloca-se para o núcleo após ativação; também é encontrado no núcleo sob condições basais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo sintético da região C-terminal (aa 450-551) de NF-kB p65 humana. Para aplicações como WB, é esperada uma banda em torno de 58-60 kDa; considere usar controles de carga apropriados e validar o sinal em linhas celulares KO.
• Este anticorpo é adequado para múltiplas aplicações; para IF/ICC, tanto sinais nucleares quanto citoplasmáticos podem ser observados dependendo do estado de ativação de NF-kB. Inclua amostras não tratadas e estimuladas para comparação.
• Para ensaios de ChIP, otimize as condições de reticulação e sonicação para o seu tipo de celular. O desempenho do anticorpo deve ser validado com regiões de genes alvo positivas e negativas.
• A reatividade cruzada com camundongo, rato e macaco é relatada; sempre verifique a especificidade na sua espécie e tecido de interesse antes de ampliar os experimentos.
• Ao usar este anticorpo validado por KO, considere incluir um controle negativo (por exemplo, lisado de knockdown por siRNA ou KO por CRISPR) para confirmar a especificidade da banda em WB.

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