Anticorpo Monoclonal Anti-NF-κB2 para WB, IHC-P, ELISA - Q00653

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NF-κB2

• O NF-κB2 codifica a subunidade p100, que passa por processamento proteolítico para gerar a subunidade p52 ativa de ligação ao DNA; a isoforma p49 também é produzida por splicing alternativo.
• A p100/p52 pertence à família de fatores de transcrição NF-kappa-B, formando homo ou heterodímeros com proteínas do tipo Rel (RELA, RELB, REL, NFKB1) para regular a expressão gênica.
• Na via não canônica do NF-kappa-B, a p100 associada à RelB é fosforilada pela IKKα e processada para p52, levando à translocação nuclear do complexo ativador transcricional RelB-p52.
• Os homodímeros p52 atuam como repressores transcricionais, enquanto os heterodímeros RelB-p52 ativam a transcrição, ligando-se aos sítios kappa-B (5'-GGRNNYYCC-3') nos promotores de genes imunes e inflamatórios.
• O NF-κB2 está envolvido em uma ampla gama de processos biológicos, incluindo inflamação, imunidade, crescimento celular, diferenciação e apoptose.
• Em conjunto com a RELB, o NF-κB2 regula o relógio circadiano ao reprimir a atividade ativadora transcricional do heterodímero CLOCK-BMAL1.
• A localização subcelular é tanto citoplasmática (como complexos inativos p100/I-kappa-B) quanto nuclear (como dímeros ativos contendo p52).
• Repetições de Ank, ligação isopeptídica e conjugação ubl (SUMOilação) são modificações pós-traducionais, e a proteína também é fosforilada.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 745-877 dentro do domínio de repetição anquirina C-terminal da p100, que está ausente na subunidade p52 processada; portanto, o anticorpo pode reconhecer preferencialmente a p100 de comprimento total (~97 kDa). Considere validar a reatividade contra p100 e p52 em seu sistema modelo, se necessário.
• Para western blotting, use condições padrão de SDS-PAGE e transferência; espera-se uma banda próxima a 97 kDa para a p100. Bandas inferiores podem representar intermediários de processamento ou produtos de degradação.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), a coloração nuclear e citoplasmática pode ser observada dependendo do status de ativação do NF-κB2 no tecido. Inclua controles apropriados para a especificidade do sinal.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado com p100 recombinante ou lisados celulares; certifique-se de que o antígeno de revestimento contenha a região do epítopo C-terminal.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato sugere a conservação da sequência imunogênica entre essas espécies, mas recomenda-se o alinhamento de sequências para confirmar a identidade do epítopo.

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