Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-NF-κB2 (fosfo S866+S870) para WB, IHC-P, ELISA - Q00653

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NF-κB2

• NF-κB2 codifica a proteína precursora p100, que sofre processamento proteossomal para gerar a subunidade ativa de ligação ao DNA p52; nomes alternativos incluem LYT10, H2TF1 e p49/p100.
• NF-κB2 é um componente central da família de fatores de transcrição NF-κB, formando heterodímeros com RELB que ativam a expressão gênica, ou homodímeros p52 que reprimem a transcrição, em resposta a estímulos imunológicos e inflamatórios.
• p100 serve como um inibidor citoplasmático do NF-κB ao reter proteínas associadas; sua fosforilação nas serinas 866 e 870 desencadeia o processamento dependente de ubiquitina para p52, permitindo a translocação nuclear.
• A via não canônica do NF-κB depende da fosforilação de p100 mediada por MAP3K14/CHUK para produzir complexos p52-RELB, que regulam genes envolvidos na organogênese linfoide, sobrevivência de células B e tumorigênese.
• NF-κB2 está implicado em rearranjos cromossômicos em linfomas (daí a designação de oncogene LYT10) e está associado a doenças de imunodeficiência primária (por exemplo, CVID10).
• No relógio circadiano, o NF-κB2 reprime a atividade transcricional de CLOCK-BMAL1, ligando a sinalização inflamatória aos ritmos biológicos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo fosforilado sintético abrangendo S866 e S870 do NF-κB2 humano; espera-se que a reatividade do anticorpo seja específica para as formas fosforiladas de p100 e p52.
• Para Western blot, trate as células alvo com ativadores da via não canônica (por exemplo, CD40L ou linfotoxina β) para induzir fosforilação e processamento. Bandas próximas a 97 kDa (p100) e 52 kDa (p52) podem ser detectadas.
• Use inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para preservar a fosforilação. Para IHC-P, otimize as condições de recuperação antigênica e valide a coloração com controles de tecido apropriados.

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