Anticorpo policlonal de coelho anti-NFE2L1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14494

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de NFE2L1

• NFE2L1 (NRF1/TCF11/LCR-F1) é um fator de transcrição bZIP do tipo CNC que atua como sensor da membrana do retículo endoplasmático. Ele se transloca para o núcleo após a clivagem por DDI2 em resposta a estresses como excesso de colesterol, estresse oxidativo ou inibição do proteassoma. Referências relacionadas: PMID:20932482, PMID:24448410
• No núcleo, NFE2L1 forma heterodímeros com proteínas Maf pequenas (MAFF, MAFG, MAFK) e se liga a elementos de resposta antioxidante (AREs), regulando assim genes essenciais para a defesa contra o estresse oxidativo e a detoxificação. Referências relacionadas: PMID:8932385, PMID:9421508
• Atua como um sensor essencial do excesso de colesterol: na membrana do retículo endoplasmático, liga-se diretamente ao colesterol por meio de seu motivo CRAC, bloqueando sua clivagem e ativação e permitindo, assim, a expressão de genes envolvidos na remoção do colesterol, como CD36.
• NFE2L1 é essencial para a homeostase do proteassoma; após a inibição do proteassoma, ativa um programa transcricional que aumenta a expressão dos genes das subunidades do proteassoma para restaurar sua função. Referências relacionadas: PMID:20932482
• Durante a hematopoiese hepática fetal, NFE2L1 desempenha um papel protetor contra danos oxidativos e contribui para a homeostase lipídica hepática.
• Juntamente com CEBPB, NFE2L1 reprime a expressão de DSPP durante a diferenciação dos odontoblastos e, nos osteoblastos, ativa SP7/Osterix em resposta ao ácido ascórbico. Referências relacionadas: PMID:15308669
• Subcelularmente, NFE2L1 está ancorado à membrana do retículo endoplasmático por meio de uma hélice transmembrana de ancoragem por sinal; após sinais de estresse, é liberado proteoliticamente e se transloca para o núcleo para exercer suas funções transcricionais.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, fosforilação e conjugação semelhante à ubiquitina, que podem regular sua estabilidade e atividade.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 515–772) corresponde a uma região na metade C-terminal de NFE2L1 humano. Essa região inclui domínios potencialmente envolvidos na ligação ao DNA e na dimerização. Quando utilizado em WB, espera-se uma banda em torno de 85 kDa para a proteína de comprimento completo; isoformas menores ou produtos de clivagem também podem ser observados.
• Para IHC-P, considere protocolos de recuperação antigênica, como a recuperação de epítopos induzida por calor em tampão citrato, pH 6,0. Otimize a concentração do anticorpo com base no tipo de tecido e na fixação.
• Em IF/ICC, certifique-se de realizar uma permeabilização adequada para detectar a proteína localizada no núcleo e no retículo endoplasmático. A coloração simultânea com marcadores de organelas pode auxiliar na interpretação.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser utilizado como reagente de captura ou de detecção, mas recomenda-se a validação do par.
• Foi relatada reatividade cruzada com NFE2L1 de camundongo e rato; contudo, confirme o desempenho no seu sistema-modelo específico.

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