Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-NFIL3 para WB, IF/ICC, ELISA - Q16649

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NFIL3

• NFIL3 (Fator nuclear regulado por interleucina-3), também conhecido como E4BP4, IL3BP1, NFIL3A ou NF-IL3A, é um regulador transcricional codificado pelo gene NFIL3 em humanos (GeneID: 4783). Reconhece e liga-se à sequência 5'-[GA]TTA[CT]GTAA[CT]-3', presente em muitos promotores celulares e virais.
• Atua tanto como repressor transcricional quanto como ativador. Reprime a transcrição a partir de promotores com sítios ATF e compete com fatores de ligação ao DNA PAR (DBP, HLF, TEF) pelo mesmo sítio de consenso. Ativa a transcrição a partir do promotor da interleucina-3 em células T.
• NFIL3 é um componente central do relógio circadiano, funcionando como um regulador negativo da expressão de PER2, influenciando assim a oscilação circadiana.
• Localizado subcelularmente no núcleo, consistente com o seu papel como fator de transcrição. É expresso em vários tecidos, incluindo bexiga, estômago, tireoide, medula espinhal, gânglio linfático, traqueia, glândula adrenal, medula óssea e músculo.
• Modificado pós-traducionalmente por fosforilação e ubiquitinação (ligação isopeptídica, conjugação Ubl), o que pode regular a sua atividade e estabilidade.
• Desempenha um papel no desenvolvimento de células imunes; protege células pró-B de apoptose e é necessário para o desenvolvimento de precursores de células natural killer.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio compreende os aminoácidos 133-462 do NFIL3 humano, cobrindo uma grande parte da proteína. Esta região inclui o domínio de ligação ao DNA e provavelmente motivos funcionais críticos, tornando o anticorpo adequado para a detecção do NFIL3 de comprimento total.
• Para o Western blot (WB), o peso molecular previsto é de 51 kDa. Use controlos positivos apropriados (por exemplo, lisados de tecidos com alta expressão de NFIL3, como gânglio linfático ou medula óssea) e verifique a especificidade da banda usando amostras de knockdown ou knockout, se disponíveis.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), certifique-se de uma fixação e permeabilização adequadas para aceder ao NFIL3 nuclear. Inclua uma contracoloração nuclear para confirmar a localização.
• Para ELISA, considere o emparelhamento com um anticorpo secundário otimizado para detecção de anticorpos policlonais de coelho. Valide as condições do ensaio usando proteína NFIL3 recombinante ou lisados celulares.
• Como o anticorpo tem reatividade cruzada com NFIL3 de rato, pode ser usado para estudos entre espécies, mas confirme sempre a reatividade na sua configuração experimental específica.

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