Anticorpo Policlonial de Coelho Anti-NFYB para WB, ELISA - P25208

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NFYB

• O gene NFYB codifica a subunidade beta do fator de transcrição nuclear Y (NF-Y), um complexo heterotrimérico que inclui as subunidades NF-YA e NF-YC. Este complexo liga-se especificamente ao motivo da caixa CCAAT (5'-CCAAT-3') em promotores eucarióticos.
• O NF-Y pode atuar como ativador ou repressor transcricional, dependendo dos cofatores com os quais interage, permitindo ajustar a expressão gênica em resposta a diversas vias de sinalização.
• Consistente com sua função de fator de transcrição, a NFYB localiza-se exclusivamente no núcleo, onde participa da ligação ao DNA e da regulação transcricional.
• A proteína está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo ubiquitinação e formação de ligações isopeptídicas, que podem modular sua estabilidade, interações ou atividade.
• A NFYB também é conhecida pelos apelidos HAP3, CBF-A, CBF-B e NF-YB, o que reflete sua identificação histórica em diferentes contextos experimentais.
• Com um peso molecular calculado de aproximadamente 22,8 kDa, a proteína NFYB humana de comprimento total compreende 207 aminoácidos, intervalo coberto pelo imunógeno usado para gerar este anticorpo.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, as diluições iniciais do anticorpo devem ser otimizadas empiricamente; anticorpos policlonais de coelho típicos podem funcionar na faixa de 1:500–1:2000, mas a validação no tecido ou lisado celular relevante é essencial.
• Este anticorpo detecta NFYB humano e de camundongo. Ao trabalhar com outras espécies, realize o alinhamento de sequências e considere testar a reatividade cruzada experimentalmente.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; o pareamento com um anticorpo secundário apropriado é necessário para geração de sinal.
• Como a NFYB é uma proteína nuclear, recomenda-se o uso de protocolos de extração nuclear para enriquecer o alvo e minimizar o ruído de fundo proveniente de proteínas citoplasmáticas.
• Como o imunógeno abrange quase toda a extensão da proteína (aa 1–207), o anticorpo policlonal provavelmente reconhece múltiplos epitopos, mas é importante estar atento à possibilidade de reatividade específica de isoformas se existirem variantes de splicing.

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