Anticorpo Monoclonal Anti-NGLY1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q96IV0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NGLY1

• NGLY1 (Peptídeo-N(4)-(N-acetil-beta-glicosaminil)asparagina amidase), também conhecido como N-glicanase 1 ou PNGase, é uma enzima citoplasmática responsável pela desglicosilação de glicoproteínas N-ligadas mal dobradas.
• Cliva especificamente a ligação β-aspartil-glicosamina (GlcNAc), convertendo asparagina em ácido aspártico, e apresenta preferência por oligossacarídeos de manose de alto peso molecular em relação aos do tipo complexo.
• O NGLY1 desempenha um papel crítico na degradação associada ao retículo endoplasmático (ERAD), reconhecendo glicoproteínas mal dobradas exportadas do RE para o citosol, tornando-as substratos para degradação proteossomal.
• A enzima é uma metaloproteína de zinco, sendo a ligação metálica essencial para sua atividade de hidrolase.
• O NGLY1 está sujeito a modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, e sofre splicing alternativo.
• Em nível subcelular, o NGLY1 localiza-se no citoplasma, consistente com sua função no controle de qualidade de proteínas citosólicas.
• Mutações no NGLY1 estão associadas à deficiência de NGLY1, uma doença congênita de desglicosilação (CDDG), destacando sua importância na manutenção da proteostase celular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado abrange a região N-terminal (aa 1-300) do NGLY1 humano, o que pode auxiliar na detecção de isoformas de comprimento total e potencialmente truncadas.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de 74 kDa; considere o uso de amostras frescas com inibidores de proteases para evitar degradação.
• Este anticorpo foi validado pelo fornecedor para WB, IHC-P, IF/ICC e ELISA; cada aplicação pode exigir otimização individual do preparo da amostra e da diluição do anticorpo.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato foi relatada; verifique a reatividade em seu sistema experimental, pois a conservação do epítopo pode variar entre os tecidos.
• Como o NGLY1 funciona no citoplasma, a fracionamento subcelular ou tampões de lise específicos podem melhorar a detecção em imunofluorescência (IF/ICC).

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