Anticorpo Policlonais Anti-NHP2 para WB, ELISA - Q9NX24

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NHP2

• A subunidade 2 do complexo ribonucleoproteico H/ACA (NHP2), também conhecida como proteína nucleolar família A membro 2 (NOLA2) ou proteína snoRNP NHP2, é um componente central do complexo pequeno ribonucleoproteico nucleolar H/ACA (snoRNP).
• A NHP2 é essencial para a biogênese de ribossomos e a manutenção de telômeros. Dentro do snoRNP H/ACA, catalisa a pseudouridilação do rRNA, convertendo uridina em pseudouridina por isomerização da ligação ribose de N1 para C5. Cada rRNA pode conter até 100 resíduos de pseudouridina, que contribuem para estabilizar a conformação do rRNA.
• A proteína também está implicada no processamento correto e na distribuição intranuclear da TERC, o componente RNA da holoenzima transcriptase reversa da telomerase (TERT), influenciando assim a homeostase dos telômeros.
• Subcelularmente, a NHP2 se localiza no núcleo, onde está enriquecida nos nucléolos e corpos de Cajal, o que é consistente com seu papel na modificação do rRNA e maturação do RNA da telomerase.
• A NHP2 é amplamente expressa em todos os tecidos humanos, incluindo cérebro, cólon, coração, rim, ovário, pâncreas, placenta, próstata, músculo esquelético, intestino delgado, baço, testículo e timo, com níveis relativamente mais baixos no fígado.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e formação de ligação isopeptídica (conjugação Ubl). Mutações no gene NHP2 estão associadas à Disqueratose Congênita, um distúrbio da biologia dos telômeros caracterizado por insuficiência medular, anomalias cutâneas e predisposição ao câncer.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo policlonal foi gerado contra uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 1–153 da NHP2 humana; espera-se que ele reconheça a NHP2 de comprimento total. A reatividade cruzada com a NHP2 de rato é confirmada; recomenda-se verificar a reatividade em outras espécies de interesse.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto da NHP2 é de aproximadamente 17 kDa. Utilize composições de gel adequadas (por exemplo, SDS-PAGE de 12–15%) e condições de transferência para proteínas de baixo peso molecular.
• Em aplicações de ELISA, as concentrações ótimas de antígeno de revestimento e as diluições do anticorpo de detecção devem ser determinadas empiricamente. Considere usar NHP2 recombinante ou lisados celulares como controles positivos.
• Por se tratar de uma proteína nuclear/nucléolar, a preparação de amostras para WB deve incluir enriquecimento nuclear eficaz ou o uso de tampões de lise adequados para solubilizar a NHP2.
• Não são fornecidos dados de desempenho quantitativo; valide sempre o anticorpo no seu sistema experimental específico com controles adequados.

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