Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-NLK para WB, IHC-P, ELISA - Q9UBE8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NLK

• NLK (Nemo-like quinase) é uma serina/treonina-proteína quinase e membro da família das quinases, também conhecida como LAK1. Contém sítios de ligação a ATP e a metais, típicos das proteínas quinases.
• Na via Wnt não canônica, a NLK atua como efetora positiva a jusante de WNT5A, TAK1 e HIPK2, influenciando a determinação do destino celular. Referências relacionadas: PMID:15004007, PMID:15764709
• A NLK regula negativamente a sinalização canônica Wnt/β-catenina por fosforilação de TCF7L2/TCF4 e LEF1, resultando na dissociação do DNA e na proteólise de LEF1, suprimindo assim a expressão de genes alvo de Wnt. Referências relacionadas: PMID:12482967, PMID:21454679
• Ela funciona como reguladora negativa da sinalização Notch por meio da fosforilação de NOTCH1, bloqueando a montagem do complexo ternário transcricionalmente ativo. Referências relacionadas: PMID:20118921
• A NLK fosforila e desestabiliza os fatores de transcrição da família MYB (MYB, MYBL1, MYBL2), inibindo sua atividade transcricional seja por promoção da proteólise ou por desrupção da ligação do coativador. Referências relacionadas: PMID:15082531
• Na sinalização IL6/IL1B, a NLK fosforila STAT3 e coopera com ATF5 para aumentar a atividade transcricional de C/EBP, além de estabilizar os níveis proteicos de ATF5. Referências relacionadas: PMID:15004007, PMID:15764709, PMID:25512613
• Sob estresse osmótico, a NLK fosforila RPTOR, inibindo o recrutamento lisossomal de mTORC1 e a sinalização a jusante. Referências relacionadas: PMID:26588989
• A NLK se localiza tanto no núcleo quanto no citoplasma, onde modula a atividade dos fatores de transcrição e a transdução de sinal.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 400-500 da NLK humana; isso pode proporcionar alta especificidade nas aplicações relevantes.
• Para Western blot, o peso molecular esperado é de aproximadamente 58 kDa; considere usar controles positivos e negativos adequados (por exemplo, linhas celulares que expressam NLK).
• Para imunohistoquímica (parafina), a recuperação de antígeno e a otimização da titulação do anticorpo podem melhorar a coloração; valide em tecidos conhecidos por expressar NLK.
• O desempenho do ELISA depende do formato do ensaio; considere configurações diretas ou indiretas com agentes de bloqueio adequados.
• Como anticorpo monoclonal de coelho, é compatível com anticorpos secundários anti-IgG de coelho; minimize a reatividade cruzada com outras espécies.
• Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento; armazene de acordo com a recomendação do fornecedor.

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