Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-NLRP3 para WB, ELISA - Q96P20

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NLRP3

• NLRP3 (proteína 3 contendo domínios NACHT, LRR e PYD), também conhecido como criopirina ou CIAS1, é um componente sensor fundamental do inflamassoma NLRP3, um complexo multiproteico central para a defesa imunológica inata.
• Ao detectar diversos sinais associados a patógenos e danos — incluindo ATP extracelular, nigericina, cristais de urato monossódico ou beta-amiloide — o NLRP3 inicia a montagem do inflamassoma recrutando PYCARD/ASC e procaspase-1, levando à ativação da caspase-1, secreção de IL-1β/IL-18 e morte celular por piroptose. Referências relacionadas: PMID:16407889 PMID:18403674 PMID:18604214 PMID:27432880 PMID:23582325 PMID:28847925 PMID:31189953
• A ativação do NLRP3 é rigorosamente controlada; ela requer efluxo de K+ e envolve o transporte mediado por dineína para o centro organizador de microtúbulos (MTOC), onde é desbloqueado por NEK7 antes de se relocalizar para membranas dispersas da rede trans-Golgi (dTGN) por meio da ligação ao fosfatidilinositol 4-fosfato para formar o inflamassoma ativo. Referências relacionadas: PMID:36442502 PMID:39173637 PMID:30487600 PMID:34554188
• Além de seu papel canônico no inflamassoma, o NLRP3 também funciona independentemente no núcleo como regulador transcricional, promovendo a diferenciação de células Th2 ao se ligar ao DNA e induzir a expressão de IL4.
• A proteína se localiza dinamicamente em vários compartimentos subcelulares, incluindo citosol, mitocôndrias, aparelho de Golgi, retículo endoplasmático e núcleo, podendo também ser secretada.
• Predominantemente expresso em macrófagos, o NLRP3 também está presente em células dendríticas, células B e T, bem como no epitélio escamoso estratificado e nos corpúsculos de Hassall no timo. Referências relacionadas: PMID:33231615 PMID:34133077 PMID:11786556 PMID:17164409
• Principais modificações pós-traducionais — incluindo fosforilação, ADP-ribosilação, palmitoilação, formação de pontes dissulfeto e ubiquitinação — ajustam finamente a estabilidade, localização e atividade do NLRP3.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, considere o uso de gel de SDS-PAGE de baixa porcentagem (ex.: 8%) e otimize as condições de transferência para o NLRP3 de alto peso molecular (~118 kDa). Um controle positivo como lisado de macrófagos THP-1 estimulados por LPS pode ser benéfico.
• Este anticorpo monoclonal de coelho é adequado para formatos padrão de ELISA; ao configurar seu ensaio, avalie as concentrações de revestimento e emparelhe com um anticorpo de detecção apropriado para a sua matriz de amostra específica.
• Dado que a expressão de NLRP3 pode ser induzida sob condições inflamatórias, o pré-tratamento de modelos celulares com ativadores de NLRP3 (ex.: LPS mais nigericina) pode melhorar a detecção tanto em WB quanto em ELISA.

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