Anticorpo Policlonal Anti-NLRP3 de Coelho para WB, IF/ICC, ELISA - Q96P20

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NLRP3

• O NLRP3 atua como o componente sensor do inflamaossoma NLRP3, iniciando a montagem do complexo com PYCARD/ASC e CASP1, o que leva à clivagem mediada pela caspase-1 e secreção das citocinas pró-inflamatórias IL1B e IL18, bem como à piroptose impulsionada por GSDMD.
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• A ativação do inflamaossoma também desencadeia a liberação extracelular de HMGB1, amplificando as respostas inflamatórias.
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• Sob condições de repouso, o NLRP3 é mantido em um estado autoinibido via ligação de ADP.
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• Uma ampla gama de sinais de perigo pode ativar o NLRP3, incluindo ATP extracelular, nigericina, espécies reativas de oxigênio, cristais de urato monossódico, cristais de colesterol, fibras de beta-amilóide e particulados ambientais.
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• Após a ativação, o NLRP3 é recrutado para o centro organizador de microtúbulos (MTOC) e, em seguida, para a membrana da rede trans-Golgi dispersa (dTGN), onde se liga ao fosfatidilinositol 4-fosfato e monta o inflamaossoma ativo.
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• O NLRP3 exibe atividade ATPase intrínseca.
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• Além de seu papel na formação do inflamaossoma, o NLRP3 pode funcionar como um fator de transcrição, regulando a diferenciação de células Th2 e a expressão de genes de citocinas (Por similaridade).

• Subcelularmente, o NLRP3 localiza-se no citosol, inflamaossoma, membrana do aparelho de Golgi, mitocôndrias, retículo endoplasmático, núcleo, e também pode ser secretado.

• A expressão tecidual é proeminente em macrófagos, células dendríticas, células B e T, e também é encontrada em células epiteliais pulmonares, condrócitos, epitélios escamosos estratificados e osteoblastos.
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Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a região N-terminal (aa 1-220) que abrange o domínio PYRIN, sugerindo reatividade com a proteína NLRP3 de comprimento total.
• Para Western blotting, o peso molecular calculado é de aproximadamente 118 kDa; use géis de acrilamida de baixa porcentagem e otimize as condições de transferência para proteínas grandes.
• Em IF/ICC, o NLRP3 pode exibir padrões de coloração citoplasmática e pontilhada perinuclear; inclua controles apropriados e valide a diluição do anticorpo primário.
• Este anticorpo policlonal é aplicável para ELISA; ao desenvolver ensaios sanduíche, recomenda-se o emparelhamento cuidadoso com um anticorpo de detecção, e a reatividade cruzada deve ser avaliada.

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