Anticorpo Policlonial de Coelho Anti-NMDAR1 para WB, IHC, IF, ELISA - Q05586

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NMDAR1

• NMDAR1 (GRIN1) codifica a subunidade GluN1 essencial dos receptores N-metil-D-aspartato (NMDA), canais catiônicos ativados por ligantes que mediam a neurotransmissão excitatória no sistema nervoso central. A proteína de comprimento total tem um peso molecular previsto de aproximadamente 105 kDa.
• Os receptores NMDA são complexos heterotetrâmeros tipicamente compostos por duas subunidades GluN1 e duas subunidades GluN2 ou GluN3. A ativação do canal requer a ligação simultânea de glutamato ao GluN2 e glicina ou D-serina ao GluN1, além da despolarização da membrana para aliviar o bloqueio de Mg²⁺ dependente de voltagem. Referências relacionadas: PMID:21376300, PMID:26875626, PMID:26919761
• A ativação do receptor leva ao influxo de Ca²⁺ e Na⁺ e efluxo de K⁺, contribuindo para a sinalização de cálcio pós-sináptica. A alta permeabilidade ao cálcio dos NMDARs é essencial para desencadear cascatas intracelulares envolvidas na plasticidade sináptica.
• Os NMDARs desempenham um papel central na potencialização de longo prazo (LTP), um correlato celular da aprendizagem e memória. A desregulação da função do GRIN1 ou do NMDAR está associada a transtornos do desenvolvimento neuropsicológico e psiquiátricos, incluindo epilepsia e deficiência intelectual. Referências relacionadas: PMID:26875626
• Diferentes subunidades GluN2 (A-D) e GluN3 (A-B) conferem propriedades cinéticas e farmacológicas distintas ao receptor, influenciando a ativação, desativação, dessensibilização, sensibilidade ao pH e modulação alostérica. Referências relacionadas: PMID:26875626, PMID:26919761, PMID:36309015
• A subunidade GluN1 está sujeita a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, ubiquitinação e formação de pontes dissulfeto, que regulam o tráfego e a função do receptor. Ela contém sítios de ligação para zinco e magnésio.
• A localização subcelular é principalmente na densidade pós-sináptica das sinapses excitatórias, onde os NMDARs se ancoram a proteínas de suporte. O receptor cicla entre pools intracelulares e a membrana sináptica.
• O splicing alternativo do GRIN1 gera múltiplas isoformas (por exemplo, de NR1-1 a NR1-4) que diferem em seus domínios C-terminais, afetando as interações proteicas e a distribuição subcelular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo sintético dentro do domínio intracelular C-terminal (resíduos 810–910) do NMDAR1 humano. Esta região pode ser útil para detectar proteínas de comprimento total ou variantes de splicing específicas.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de 105 kDa. Considere usar um gel de SDS-PAGE de 6–8% e membrana de PVDF para transferência eficiente desta proteína grande. Valide a especificidade da banda com controles apropriados.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), otimize as condições de fixação e permeabilização para o seu tipo de tecido ou célula. A recuperação de antígeno pode aumentar o sinal em seções fixadas em formalina e embebidas em parafina.
• A reatividade cruzada com humano, camundongo e rato é indicada pelo fabricante, mas a homologia de sequência do imunógeno entre essas espécies deve ser verificada antes do uso em sistemas não humanos.
• Este anticorpo policlonal também pode ser adequado para ELISA; considere combiná-lo com um anticorpo de captura monoclonal se estiver desenvolvendo um ensaio sandwich.

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