Anticorpo policlonal anti-NME1/NM23A para WB, IF/ICC, ELISA - P15531

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da NME1/NM23A

• A NME1/NM23A, também conhecida como cinase A de difosfato de nucleosídeos (NDK A) ou NM23-H1, é um membro ubiquamente expresso da família das cinases de difosfato de nucleosídeos e foi originalmente identificada como um inibidor de metástase.
• Atividade central de cinase de difosfato de nucleosídeos: catalisa a transferência do grupo gama-fosforila do ATP para difosfatos de nucleosídeos (GDP, CDP, UDP etc.), mantendo a homeostase dos trifosfatos de nucleosídeos; também fosforila pirofosfatos de geranila e farnesila, estabelecendo uma ligação com o metabolismo dos isoprenoides. Referências relacionadas: PMID:10952986, PMID:14960567, PMID:16313181
• Foram demonstradas funções adicionais de cinase não específicas, incluindo atividades de cinase de proteínas de serina/treonina e de histidina, sugerindo funções na transdução de sinais. Referências relacionadas: PMID:8529641, PMID:9038158
• A NME1 possui atividades nucleolíticas sobre o DNA: atua como uma endonuclease de DNA de fita simples dependente de Mg²⁺ no complexo SET, cooperando com a TREX1 para mediar a fragmentação apoptótica do DNA, e também funciona como uma exonuclease de DNA 3′-5′. Referências relacionadas: PMID:12628186, PMID:16818237, PMID:11694515, PMID:14960567, PMID:16313181
• É necessária para a motilidade celular e está envolvida na regulação da metástase tumoral e da diferenciação celular. Referências relacionadas: PMID:8270257, PMID:25582197
• Localização subcelular: encontrada no citoplasma, no núcleo e na membrana celular.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 10-110 da NME1 humana, uma região prevista como acessível e conservada; a reatividade cruzada com rato implica conservação do epítopo entre as espécies.
• Para western blot (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 17 kDa em condições redutoras; otimize a diluição do anticorpo (por exemplo, 1:500–1:2000) e os tempos de exposição com base na abundância da amostra.
• A IF/ICC pode exigir protocolos de permeabilização para detectar as frações nucleares e associadas à membrana; recomenda-se a coloração simultânea com marcadores específicos de compartimentos.
• Os ensaios ELISA podem ser desenvolvidos utilizando o anticorpo como reagente de captura ou detecção; a combinação com um anticorpo monoclonal compatível pode aumentar a especificidade para aplicações quantitativas.
• Como a NME1 é amplamente expressa, utilize controles positivos apropriados (por exemplo, HEK293, HeLa) e controles negativos (knockdown/knockout) para validar a especificidade do sinal.

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