Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-NNMT para WB, IF/ICC, ELISA - P40261

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NNMT

• A NNMT é uma metiltransferase citoplasmática que catalisa a N-metilação da nicotinamida, uma etapa fundamental na eliminação da vitamina B3 (nicotinamida), utilizando a S-adenosil-L-metionina (SAM) como doador de metila.
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• Ao consumir SAM, a NNMT regula o potencial de metilação celular e medeia modificações epigenéticas, notavelmente reduzindo a marca repressiva de histona H3K27me3, promovendo assim alterações transcricionais globais.
  Referências relacionadas: PMID:23455543 PMID:26571212 PMID:31043742
• A NNMT contribui para o estado pluripotente das células-tronco embrionárias ao limitar os níveis de H3K27me3, característico da paisagem epigenética pré-implantação.
  Referências relacionadas: PMID:26571212
• Como regulador metabólico, a NNMT influencia o gasto energético do tecido adiposo branco, a gliconeogênese hepática e a biossíntese de colesterol, em parte por afetar o fluxo de poliaminas e as vias de recuperação de NAD+.
• A NNMT pode N-metilar outros compostos de piridina estruturalmente relacionados à nicotinamida, sugerindo um papel na desintoxicação de xenobióticos.
  Referências relacionadas: PMID:30044909
• É expressa predominantemente no fígado, com níveis mais baixos em rim, pulmão, músculo esquelético, placenta e coração; não é detectada no cérebro ou pâncreas.
• As modificações pós-tradução incluem acetilação e citrulinação, e a proteína é um membro do proteoma de referência bem caracterizado, com evidência direta de sequenciamento.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína recombinante que abrange a sequência completa da NNMT humana (aa 1–264). Espera-se que esse design gere anticorpos que reconhecem a estrutura nativa da proteína; no entanto, recomenda-se a validação empírica para cada aplicação.
• Para Western blotting, é esperada uma banda em torno de 30 kDa. Otimize a diluição do anticorpo e as condições de detecção usando controles positivos adequados (por exemplo, lisado de fígado) e considere a fracionamento subcelular para enriquecer proteínas citoplasmáticas.
• Na imunofluorescência/ICC, a NNMT é citoplasmática. Utilize protocolos adequados de fixação e permeabilização para preservar antígenos citoplasmáticos e valide com tecidos negativos conhecidos (por exemplo, cérebro).
• Para aplicações de ELISA, formatos diretos ou sanduíche podem ser testados, com titulação cuidadosa do antígeno de revestimento e do anticorpo. A reatividade cruzada com NNMT de camundongo e rato pode permitir o desenvolvimento de ensaios multiespécies, mas a homologia de sequência deve ser verificada.
• Não são fornecidas diluições pré-validadas nem dados de desempenho; todo sistema experimental requer otimização individual.

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