Anticorpo Policlonal Anti-NOL3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60936

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína Nucleolar 3 (NOL3)

• NOL3 (Proteína nucleolar 3), também conhecida como repressor da apoptose com domínio CARD (ARC) ou Nop30, é uma proteína multifuncional codificada pelo gene NOL3 em humanos. Pertence à família dos repressores da apoptose e contém um domínio CARD.
• NOL3 bloqueia a via apoptótica extrínseca ao interferir na montagem do complexo de sinalização indutor de morte (DISC) por meio de interações com FAS e FADD, e ao limitar a disponibilidade de CASP8 via localização mitocondrial dependente de fosforilação (Por similaridade).
• Na via intrínseca, NOL3 se liga diretamente a BAX, prevenindo sua ativação, a disfunção mitocondrial e a liberação de fatores pró-apoptóticos. Referências relacionadas: PMID:15004034
• NOL3 atua como um tampão de cálcio citosólico, dissociando-se de CASP8 para manter a homeostasia do cálcio, inibindo assim a morte celular mediada por cálcio. Referências relacionadas: PMID:15509781
• Outras funções antiapoptóticas incluem a supressão da apoptose induzida por estresse oxidativo (via bloqueio da ativação de CASP2 e translocação de BAX), da apoptose induzida por hipóxia (inibição da liberação de citocromo c) e da necrose induzida por TNF (ao impedir o recrutamento de RIPK1 para o complexo I) (Por similaridade).
• A localização subcelular inclui nucléolo, citoplasma, mitocôndrias, retículo sarcoplasmático e membrana, o que é consistente com suas diversas funções no splicing de RNA e na morte celular.
• Especificidade tecidual: altamente expressa no coração e músculo esquelético; detectada em níveis baixos na placenta, fígado, rim e pâncreas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), uma banda específica de aproximadamente 23 kDa é esperada em condições desnaturantes redutoras. Lisados de coração ou músculo esquelético são recomendados como controles positivos.
• Na imunohistoquímica (IHC-P), pode ser necessária a recuperação de antígeno. A coloração positiva deve ser observada em cardiomiócitos ou fibras musculares esqueléticas; considere usar controles de isotipo para confirmar a especificidade.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), observe que NOL3 apresenta coloração tanto nuclear quanto citoplasmática. A co-coloração com marcadores de organelas (por exemplo, mitotracker para mitocôndrias) pode ajudar a confirmar o direcionamento subcelular.
• Ao configurar o ELISA, o imunógeno recombinante de comprimento total pode servir como padrão; a diluição do anticorpo deve ser otimizada empiricamente para o formato específico do ensaio.
• Devido à natureza policlonal, a consistência entre lotes deve ser monitorada; é recomendada a validação inicial no sistema de amostra relevante antes de estudos em larga escala.

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