Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-NOP10 para WB, IHC-P, IP, ELISA - Q9NPE3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NOP10

• A NOP10 (proteína nucleolar 10), também conhecida como NOLA3 e DKCB1, é uma subunidade central do complexo de ribonucleoproteínas nucleolares pequenas H/ACA (snoRNP).
• Este complexo é essencial para a biogénese dos ribossomas e a manutenção dos telómeros, catalisando a pseudouridilação do rRNA — uma modificação na qual a uridina é isomerizada em pseudouridina (PubMed:32554502). Referências relacionadas: PMID:32554502
• A NOP10 localiza-se predominantemente no nucléolo e nos corpos de Cajal no interior do núcleo, em consonância com o seu papel na modificação e processamento do RNA.
• Está implicada no processamento e no transporte intranuclear do TERC, o componente de RNA da telomerase, contribuindo assim para a homeostase dos telómeros.
• Mutações no gene NOP10 estão associadas à disqueratose congénita, uma doença multissistémica que pode incluir cataratas, surdez e outras manifestações clínicas, destacando a sua importância nas doenças humanas.
• Palavras-chave adicionais do UniProt incluem: estrutura 3D, variante associada a doença, proteoma de referência, ribonucleoproteína, biogénese dos ribossomas, processamento de rRNA.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um péptido sintético correspondente aos aminoácidos 1-64 da NOP10 humana, uma região que apresenta elevada homologia de sequência com as proteínas de camundongo e rato, sustentando a reatividade cruzada observada.
• Para western blot, o peso molecular previsto da NOP10 é de aproximadamente 8 kDa. Considere utilizar um gel de SDS-PAGE a 15% ou um gel de gradiente e uma membrana de PVDF com poros de 0,2 µm para assegurar uma transferência eficiente desta proteína de pequenas dimensões.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), otimize as condições de recuperação antigénica (por exemplo, recuperação de epítopos induzida por calor com tampão de citrato, pH 6,0) e a diluição do anticorpo primário para cada tecido e protocolo de fixação.
• Para imunoprecipitação (IP), confirme a compatibilidade com o tampão de lise e a concentração de anticorpo escolhidos; a pré-clarificação pode reduzir a ligação não específica.
• Em ELISA, realize titulações em tabuleiro de xadrez para determinar as concentrações ideais do antigénio de revestimento e do anticorpo; o imunogénio peptídico sugere uma possível utilização em formatos de ELISA direto ou sanduíche.
• Dado que a NOP10 funciona no núcleo/nucléolo, o fracionamento subcelular pode melhorar a deteção em ensaios de western blot ou IP.

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