Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-NOTCH2 para WB, IF/ICC, ELISA - Q04721

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NOTCH2

• NOTCH2 (Proteína homóloga ao locus neurogênico notch 2), também conhecido como AGS2, HJCYS, hN2, é um grande receptor transmembrana tipo I de passagem única que desempenha um papel central na via de sinalização Notch, governando decisões sobre o destino celular.
• Após o engajamento pelos ligantes ligados à membrana Jagged-1, Jagged-2 ou Delta-1, o domínio intracelular (NICD) é liberado e transloca para o núcleo, onde forma um complexo ativador transcricional com RBPJ para induzir genes alvo, como o locus potenciador de divisão. Referências relacionadas: PMID:21378985 PMID:21378989
• NOTCH2 pertence à família de receptores NOTCH, caracterizada por múltiplas repetições extracelulares semelhantes a EGF e repetições intracelulares de anquirina (ANK), ambas essenciais para a ligação do ligante e transdução de sinal.
• Subcelularmente, o NOTCH2 localiza-se na membrana celular; após a ativação, o NICD entra no núcleo, e a proteína também é detectada no citoplasma.
• A proteína está sujeita a glicosilação e fosforilação, contendo ligações dissulfeto e sendo uma fosfoproteína; é classificada sob as palavras-chave do UniProt como regulação da transcrição, proteína do desenvolvimento e glicoproteína.
• NOTCH2 é amplamente expresso, com altos níveis no cérebro, coração, rim, pulmão, músculo esquelético e fígado, e mostra expressão ubíqua durante o desenvolvimento embrionário.
• Na biologia dos osteoclastos, o NOTCH2 colabora com RELA/p65 para aumentar a atividade do promotor NFATc1, promovendo a diferenciação induzida por RANKL, e também suporta a autorrenovação de células de câncer de fígado. Referências relacionadas: PMID:29149593 PMID:25985737

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 1697–1819 dentro da região citoplasmática do NOTCH2 humano. Esta sequência é altamente conservada entre humano, camundongo e rato, suportando ampla reatividade.
• Para Western blotting, espere uma banda próxima a 265 kDa para o NOTCH2 de comprimento total; produtos de clivagem podem aparecer em pesos moleculares mais baixos. A validação em linhas celulares que expressam NOTCH2 (por exemplo, modelos de câncer de fígado ou osteoclastos) é aconselhável.
• Na imunofluorescência/ICC, a acessibilidade do epítopo pode exigir permeabilização para detecção intracelular; a localização nuclear pode ser visualizada sob condições apropriadas de ativação por ligante.
• Quando usado em ELISA, o anticorpo pode servir como reagente de captura ou detecção para NOTCH2 humano, de camundongo ou rato, mas as concentrações ideais de revestimento devem ser determinadas empiricamente.

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