Anticorpo Policlonal Anti-NOX2/gp91phox para WB, ELISA - P04839

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de NOX2/gp91phox

• NOX2/gp91phox, também conhecido como CYBB ou NADPH oxidase 2, é a subunidade catalítica de cadeia pesada do complexo citocromo b-245 dos fagócitos.
• Subunidade catalítica que medeia a transferência de elétrons do NADPH citosólico para o O2 para produzir ânion superóxido, um precursor de espécies reativas de oxigênio críticas para a morte microbiana (PubMed:15338276, PubMed:36241643, PubMed:36413210). Referências relacionadas: PMID:15338276 PMID:36241643 PMID:36413210
• A transferência de elétrons envolve a redução sequencial de FAD e dois cofatores heme para reduzir O2 (PubMed:38355798). Referências relacionadas: PMID:38355798
• A ativação requer a montagem de subunidades citosólicas (por exemplo, p47-phox/NCF1) com o citocromo b-245 ligado à membrana, desencadeada por fosforilação e translocação de membrana (PubMed:19028840, PubMed:38355798). Referências relacionadas: PMID:19028840 PMID:38355798
• Localizado principalmente na membrana celular e na membrana fagossomal dos fagócitos.
• Detectado em neutrófilos, onde desempenha um papel central no surto respiratório.
• Mutações no gene CYBB causam doença granulomatosa crônica ligada ao X (DGC), caracterizada por produção defeituosa de superóxido e infecções recorrentes.
• Contém domínios de ligação a FAD e NADPH, dois hemes e é N-glicosilado; regulado por fosforilação e ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 101-200 do NOX2/gp91phox humano; o anticorpo policlonal resultante pode reconhecer múltiplos epítopos dentro desta região. Recomenda-se validar a especificidade usando controles positivos (por exemplo, lisados de neutrófilos) e negativos.
• Para Western blotting, espera-se uma banda primária em torno de 65 kDa para a forma não glicosilada; bandas adicionais em pesos moleculares mais altos podem corresponder a espécies glicosiladas (gp91phox). Otimize as condições de bloqueio e detecção de acordo.
• Relata-se que o anticorpo reage de forma cruzada com rato e rato; no entanto, devido a variações de sequência, confirme a reatividade no seu sistema modelo específico.
• Em aplicações de ELISA, considere ensaios de competição com peptídeo para avaliar a especificidade.
• Como o alvo é uma proteína transmembrana, a inclusão de detergentes suaves em tampões de lise pode melhorar a solubilização.

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