Anticorpo Policlonal Anti-NOXA2/p67phox para WB, IF-P, ELISA - P19878

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NOXA2/p67phox (NCF2)

• O fator citosólico de neutrófilos 2 (NCF2), também conhecido como NOXA2, p67-phox, p67-PHOX e fator de oxidase de neutrófilos de 67 kDa, é uma subunidade citosólica do complexo de oxidase NADPH de fagócitos.
• O NCF2 é essencial para a produção do ânion superóxido (O2(-)) ao mediar a transferência de elétrons do NADPH para o O2 dentro do complexo de oxidase NADPH ativado (PubMed:12207919, PubMed:38355798). Referências relacionadas: PMID:12207919, PMID:38355798
• A ativação do complexo de oxidase NADPH é iniciada pela ligação dependente de fosforilação da subunidade citosólica NCF1/p47-phox ao CYBA/p22-phox, promovendo a montagem na membrana plasmática ou na membrana fagossomal.
• A proteína localiza-se no citoplasma e transloca para as membranas após ativação.
• O NCF2 é uma fosfoproteína e contém repetições TPR e um domínio SH3, que medeiam interações proteína-proteína dentro do complexo da oxidase.
• Mutações no NCF2 estão associadas à doença granulomatosa crônica, uma imunodeficiência primária caracterizada pela produção defeituosa de superóxido.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e a isoforma canônica tem um peso molecular de aproximadamente 60 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante cobrindo os aminoácidos 227–526 do NCF2 humano (NP_000424.2). Como um anticorpo policlonal, ele pode reconhecer múltiplos epítopos e potencialmente reagir de forma cruzada com isoformas ou ortólogos.
• Para Western blot (WB), a banda alvo esperada está em torno de 60 kDa; considere otimizar a preparação do lisado e a diluição do anticorpo para uma detecção clara. Valide com controles positivos e negativos apropriados.
• Em imunofluorescência (IF-P), certifique-se de uma fixação e permeabilização adequadas para detectar o NCF2 citosólico e translocado para a membrana. Use linhagens de células relevantes ou células primárias.
• Para ELISA, determine o antígeno de revestimento ideal e a titulação do anticorpo para alcançar a sensibilidade e especificidade desejadas.
• A reatividade cruzada com camundongo é relatada; valide em seu sistema de amostra específico se usado para modelos não humanos.

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