Anticorpo policlonal anti-NPB para WB, IF/ICC, ELISA - Q8NG41

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do Neuropeptídeo B

• O Neuropeptídeo B (NPB) é uma pré-pró-proteína que sofre processamento proteolítico para gerar o neuropeptídeo maduro, pertencente à família dos neuropeptídeos B/W.
• Pode desempenhar funções na regulação do comportamento alimentar, na função do sistema neuroendócrino e em aspectos da memória e da aprendizagem.
• O NPB tem sido implicado na via aferente da dor, sugerindo um papel na percepção ou modulação da dor.
• A proteína é secretada e amplamente expressa no sistema nervoso central, com níveis elevados na substância negra, no hipotálamo, no hipocampo, na medula espinhal, na placenta e no cérebro fetal.
• Uma expressão mais baixa é detectada nos testículos, no útero e nos ovários e, notavelmente, uma expressão elevada também é encontrada no adenocarcinoma colorretal, indicando um possível envolvimento no câncer.
• O registro do UniProt classifica o NPB com palavras-chave que incluem clivagem em um par de resíduos básicos, sequenciamento direto de proteínas e neuropeptídeo, refletindo o processamento do peptídeo maduro e sua caracterização funcional.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1-125 do NPB humano de comprimento completo, abrangendo toda a pré-pró-proteína; portanto, o anticorpo pode reconhecer tanto as formas não processadas quanto as processadas. Os pesquisadores devem verificar o tamanho da banda detectada no Western blot, que pode corresponder ao peso molecular previsto do neuropeptídeo processado caso ocorra clivagem no sistema experimental.
• Para Western blot (WB), considere o uso de condições redutoras e controles de carregamento apropriados de tecidos com expressão conhecida de NPB (por exemplo, regiões cerebrais como o hipotálamo). Titule o anticorpo primário para obter uma relação sinal-ruído ideal.
• Na imunofluorescência/imuno-histoquímica (IF/ICC), as condições de permeabilização e fixação devem ser otimizadas, especialmente porque o alvo é secretado, para detectar intermediários do processamento intracelular ou sinal extracelular.
• O anticorpo é adequado para ELISA; considere seu uso como reagente de captura ou detecção em um ELISA sanduíche após a validação do pareamento. A reatividade cruzada com camundongo sugere conservação da sequência; valide a especificidade em controles knockout, se possível.

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