Anticorpo Policlonal Anti-NPC2 (HE1, EDDM1) para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P61916

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NPC2

• O NPC2 (também conhecido como HE1, EDDM1) é um transportador intracelular de colesterol que desempenha um papel crítico na saída do colesterol do compartimento lisossomal.
• Atua em conjunto com o NPC1; o colesterol liberado das LDLs nos endossomos tardios/lisossomos é transferido pelo NPC2 para o bolsão de ligação ao colesterol do NPC1.
  Referências relacionadas:
  PMID:17018531 PMID:18772377 PMID:27238017
• O NPC2 liga-se ao colesterol com estequiometria 1:1 e também pode se ligar a uma variedade de outros esteróis, incluindo esteróis de plantas.
  Referências relacionadas:
  PMID:17018531
• A forma secretada do NPC2 regula a secreção biliar de colesterol através da estimulação do transporte mediado por ABCG5/ABCG8.
• Subcelularmente, o NPC2 é encontrado no lisossomo, retículo endoplasmático e é secretado.
• É detectado em múltiplos tecidos, incluindo bile da vesícula biliar, fibroblastos, rim, fígado, baço, intestino delgado, placenta, testículo e epidídimo.
• A proteína contém um peptídeo sinal e apresenta modificações pós-traducionais, como pontes dissulfeto, glicosilação e acetilação; mutações no NPC2 estão ligadas à doença de Niemann-Pick tipo C2.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra uma proteína de fusão recombinante que abrange os aminoácidos 20–151 do NPC2 humano, o que corresponde à proteína madura completa após o clívagem do peptídeo sinal. Este design pode garantir o reconhecimento do NPC2 endógeno.
• Para Western blotting, antecipe uma banda em aproximadamente 17 kDa; valide o anticorpo em lisados de controle positivo (por exemplo, fibroblastos humanos ou tecido renal) e considere o uso de um agente redutor, dada a presença de pontes dissulfeto.
• Em aplicações de IHC-P ou IF-P, inclua etapas apropriadas de recuperação de antígenio e verifique a coloração em cortes de tecido conhecidos por expressar NPC2 (como rim ou testículo).
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com o NPC2 de camundongo e rato; no entanto, a homologia de sequência entre espécies deve ser verificada para epítopos específicos, e o anticorpo deve ser validado no modelo experimental relevante.

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