Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-NPHP4 para WB, IF/ICC, ELISA - O75161

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Nefrocistina-4

• A nefrocistina-4 (também conhecida como nefroretinina) é codificada pelo gene NPHP4; múltiplas isoformas são produzidas por splicing alternativo.
• Está envolvida na organização das junções apicais e na função ciliar; propõe-se que atue dentro de um módulo NPHP1-4-8. É necessária para a formação de cílios funcionais e contribui para a organização da rede de actina subapical em células epiteliais multiciliadas. Referências relacionadas: PMID:19755384 PMID:21565611
• Coopera com o INVS para down-regulação da via canônica de Wnt e promove a via Wnt-PCP regulando as proteínas disheveled. Estabiliza a JADE1 e promove sua translocação nuclear, levando a uma inibição cooperativa da sinalização canônica de Wnt. Referências relacionadas: PMID:21498478 PMID:22654112
• Atua como regulador negativo da via Hippo ao se associar com LATS1 e modular a fosforilação dependente de LATS1 e a localização de WWTR1/TAZ. Referências relacionadas: PMID:21555462
• A localização subcelular inclui citoplasma, corpo basal do cílio, centrossomo, junções apertadas e núcleo, o que é consistente com seus papéis nas funções ciliares e juncionais.
• É expressa predominantemente no rim, músculo esquelético, coração e fígado; menor expressão é encontrada no cérebro e pulmão.
• É fosforilada nas células, o que pode influenciar suas atividades de sinalização. Mutações no gene NPHP4 estão associadas à nefronoftise, síndrome de Senior-Loken e amaurose congênita de Leber, destacando sua importância clínica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região C-terminal (aminoácidos 1247–1426). Verifique a reatividade ao trabalhar com isoformas ou variantes de splicing que possam diferir nesse domínio.
• Validado para Western blot (WB), imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC) e ELISA com amostras humanas, de camundongo e rato. Se utilizar outras espécies, realize um experimento piloto de reatividade cruzada.
• Para WB, o peso molecular previsto é de ~158 kDa; utilize um gel de acrilamida de baixa porcentagem e tempos de transferência estendidos para garantir boa resolução e transferência de proteínas de alto peso molecular.
• Em IF/ICC, a localização do alvo inclui cílios e junções apertadas. Otimize as condições de fixação e permeabilização para preservar essas estruturas e a acessibilidade do epítopo.

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