Anticorpo Policlon de Coelho Anti-NPRL2 para WB, IF/ICC, ELISA - Q8WTW4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NPRL2

• NPRL2 (também conhecido como NPR2, NPR2L, TUSC4, FFEVF2) é um componente catalítico do complexo GATOR1, que atua como inibidor da ramificação de detecção de aminoácidos da via mTORC1. Referências relacionadas: PMID:23723238, PMID:29590090, PMID:35338845
• Em condições de privação de aminoácidos, o GATOR1 atua como proteína ativadora de GTPase (GAP) para RagA/RRAGA ou RagB/RRAGB, convertendo-os para o estado inativo ligado ao GDP, levando à liberação do mTORC1 dos lisossomos e à inibição da via. Referências relacionadas: PMID:23723238, PMID:29590090, PMID:35338845
• Quando os aminoácidos estão abundantes, o GATOR2 ubiquitina e inibe o GATOR1, permitindo a ativação do mTORC1; além disso, a PRMT1 metila o NPRL2 em condições de suficiência de metionina, inibindo sua atividade GAP. Referências relacionadas: PMID:23723238, PMID:36528027, PMID:27173016, PMID:30651352, PMID:35338845
• O NPRL2 funciona como um supressor tumoral ao suprimir a fosforilação de tirosina dependente de Src e a ativação da PDPK1 e sua via de sinalização a jusante, inibindo assim o crescimento celular e aumentando a sensibilidade a fármacos anticâncer. Referências relacionadas: PMID:18616680
• Subcelularmente, o NPRL2 se localiza na membrana do lisossomo, onde exerce seu papel regulatório na sinalização do mTORC1.
• A expressão tecidual é mais alta no músculo esquelético, seguida por cérebro, fígado e pâncreas, com níveis mais baixos em pulmão, rim, placenta e coração; também é expresso em várias regiões cerebrais e na maioria das linhas celulares de câncer de pulmão. Referências relacionadas: PMID:26505888, PMID:27173016
• O NPRL2 está associado a variantes de doenças ligadas à epilepsia e está sujeito a splicing alternativo e modificações pós-traducionais, incluindo metilação e ubiquitinação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante que cobre os aminoácidos 1–220 do NPRL2 humano (NP_006536.3). Esta região N-terminal pode ser adequada para detectar o NPRL2 de comprimento total entre diferentes espécies.
• As aplicações validadas incluem Western blot (WB), imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC) e ELISA. Foi relatada reatividade cruzada com amostras humanas, de camundongo e de rato; recomenda-se a validação específica da espécie para o seu sistema experimental.
• Para WB, é esperada uma banda de aproximadamente 44 kDa. Devido à natureza policlonal, podem ser observadas bandas inespecíficas adicionais; recomenda-se a otimização do bloqueio e da diluição do anticorpo.
• Ao usar IF/ICC, métodos adequados de fixação e permeabilização devem ser testados, pois o NPRL2 se localiza nas membranas lisossomais.

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