Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-NPSR1 para WB e ELISA - Q6W5P4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NPSR1

• O NPSR1 codifica o receptor de neuropeptídeo S, também conhecido como receptor acoplado à proteína G 154 (GPR154), GPRA ou PGR14, um RCPG típico de sete transmembranares.
• A ativação do receptor pelo neuropeptídeo S (NPS) inicia uma sinalização dupla: a ativação da fosfolipase C dependente de Gq mobiliza o Ca²⁺ intracelular, e a estimulação dependente de Gs eleva os níveis de cAMP (PubMed:15312648, PubMed:15947423, PubMed:16720571, PubMed:26865629). Referências relacionadas: PMID:15312648 PMID:15947423 PMID:16720571 PMID:26865629
• Ambas as vias do Ca²⁺ e do cAMP convergem para a fosforilação da ERK1/2, e a ligação do NPS inibe, em última análise, o crescimento celular (PubMed:15947423, PubMed:26865629). Referências relacionadas: PMID:15947423 PMID:26865629
• O splicing alternativo do NPSR1 gera múltiplas isoformas com perfis de expressão distintos: a isoforma 1 é predominante no músculo liso, enquanto a isoforma 4 é ubíqua nos tecidos epiteliais, incluindo brônquios, estômago, intestino e útero (PubMed:15947423). Referências relacionadas: PMID:15947423
• A nível subcelular, o NPSR1 encontra-se na membrana celular e pode ciclar para o citoplasma, uma característica comum dos RCPGs ativados.
• A expressão do NPSR1 está significativamente aumentada no músculo liso brônquico e no epitélio de pacientes com asma, ligando este receptor à fisiopatologia da asma (PubMed:15947423). Referências relacionadas: PMID:15947423
• As principais modificações pós-traducionais incluem a glicosilação N-ligada e as ligações dissulfeto conservadas, críticas para o dobramento do receptor e a ligação do ligando.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo sintético mapeado para a região C-terminal (aa 200–C-terminal) da isoforma 1 do NPSR1 humano (NP_001287863.1). Esta região é intracelular e pode ser conservada entre variantes de splicing; verifique a reatividade com a sua isoforma específica de interesse.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em torno de 43 kDa para o receptor de comprimento total, mas a glicosilação ou a dimerização podem produzir espécies de peso molecular maior. Valide a especificidade do anticorpo em modelos celulares com superexpressão de NPSR1 versus knockdown/knockout.
• Em aplicações de ELISA, o revestimento direto do peptídeo imunogénio ou do domínio extracelular recombinante do NPSR1 pode ser adequado. Otimize as condições de revestimento e inclua controlos negativos.
• Dada a expressão do receptor no músculo liso e epitélios, considere o uso de lisados de células do músculo liso brônquico, cólon ou útero para testes iniciais.
• Uma vez que o NPSR1 é um RCPG, são recomendados protocolos de extração de proteínas de membrana para uma deteção ideal por WB.

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