Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-NQO1 para WB, IF/ICC, ELISA - P15559

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NAD(P)H desidrogenase [quinona] 1 (NQO1)

• NQO1 (NAD(P)H desidrogenase [quinona] 1) é uma enzima contendo flavina que catalisa a redução de dois elétrons de quinonas a hidroquinonas, utilizando NADH ou NADPH como doadores de elétrons. Os elétrons são transferidos sequencialmente do NAD(P)H para o cofator flavina e depois da flavina reduzida para a quinona, contornando a formação de semiquinona e espécies reativas de oxigênio. Referências relacionadas: PMID:8999809 PMID:9271353

• A enzima desempenha um papel central na regulação redox celular, desintoxicando quinonas e reduzindo componentes do sistema redox da membrana plasmática, como a coenzima Q e vitaminas quinonas, para produzir formas antioxidantes de hidroquinona. Pode funcionar como um sequestrador de superóxido para evitar a oxidação da hidroquinona e facilitar a excreção. Referências relacionadas: PMID:15102952 PMID:8999809 PMID:9271353

• O NQO1 também pode ativar certas quinonas e seus derivados, gerando hidroquinonas reativas ao redox com potencial de ligação cruzada ao DNA e atividades antitumorais. Referências relacionadas: PMID:8999809

• Sob estresse oxidativo, o NQO1 interage com os supressores de tumor TP53 e TP73 de maneira dependente de NADH, inibindo sua degradação independente de ubiquitina pelo proteassoma 20S. Referências relacionadas: PMID:15687255 PMID:28291250

• A proteína está localizada no citoplasma e no citosol.

• O NQO1 é uma fosfoproteína sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, formação de ligações isopeptídicas e conjugação tipo ubiquitina, que podem regular sua atividade e estabilidade.

• O splicing alternativo do gene NQO1 gera múltiplas variantes de transcrição, potencialmente dando origem a diferentes isoformas proteicas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a sequência completa do NQO1 humano (aminoácidos 1–274), portanto, o anticorpo pode reconhecer formas proteicas nativas e desnaturadas em aplicações como WB, IF/ICC e ELISA.
• Para WB, considere usar um gel desnaturante redutor padrão e validar a banda detectada em aproximadamente 31 kDa usando um lisado de células ou tecidos relevante conhecido por expressar NQO1 (por exemplo, fígado, rim ou linhagens de células cancerígenas).
• Em IF/ICC, inclua etapas apropriados de permeabilização e fixação para garantir o acesso ao alvo citosólico; uma contracoloração nuclear pode ajudar a visualizar a localização.
• Titule o anticorpo para cada aplicação e sistema biológico, e inclua controles positivos e negativos adequados para confirmar a especificidade, especialmente dado o potencial de múltiplas isoformas.

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