Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-NRF2 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q16236

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NRF2

• O NRF2 é um fator de transcrição que se liga a elementos de resposta antioxidante (ARE) nos promotores de genes citoprotetores (por exemplo, enzimas de desintoxicação de fase 2) para neutralizar eletrófilos reativos, desempenhando um papel central na homeostase redox celular. Referências relacionadas: PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201

• Sob condições basais, o NRF2 é ubiquitinado e degradado no citoplasma através do complexo de ligase de ubiquitina E3 KEAP1-CUL3-RBX1; o estresse eletrofílico inativa o complexo, levando à estabilização do NRF2, translocação nuclear, heterodimerização com pequenas proteínas Maf e transcrição dependente de ARE. Referências relacionadas: PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:19489739, PMID:29590092

• A autofagia seletiva também desencadeia a ativação do NRF2 através da interação KEAP1-SQSTM1/p62, promovendo o acúmulo nuclear e a expressão de genes citoprotetores. Referências relacionadas: PMID:20452972

• Durante a resposta à proteína desenovelada (UPR), o NRF2 contribui para a homeostase redox e a sobrevivência celular (Por similaridade).

• O NRF2 é um regulador crítico da imunidade inata: suprime as respostas inflamatórias dos macrófagos bloqueando a transcrição de citocinas pró-inflamatórias e inibindo o recrutamento da RNA Pol II nos promotores de genes pró-inflamatórios, independentemente de motivos ARE e níveis de ROS (Por similaridade).

• O NRF2 reprime a detecção citosólica de DNA antiviral reduzindo a expressão de STING1, diminuindo a responsividade aos agonistas do STING1 e aumentando a suscetibilidade à infecção por vírus de DNA. Referências relacionadas: PMID:30158636

• O NRF2 limita a liberação de citocinas pró-inflamatórias durante a infecção por SARS-CoV-2 e inibe a replicação de múltiplos vírus patogênicos (por exemplo, HSV-1, HSV-2, Vaccinia, Zika) através de um mecanismo independente de interferão do tipo I. Referências relacionadas: PMID:33009401

• O NRF2 é uma proteína amplamente expressa de ~68 kDa (pode migrar mais alto devido a modificações pós-traducionais) com os níveis mais altos em músculo adulto, rim, pulmão, fígado e músculo fetal; sua atividade é modulada por fosforilação, acetilação, ubiquitinação e glicação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 243–400, abrangendo a região básica e o domínio de zíper de leucina; considere que esta região pode aumentar a detecção da proteína nativa em condições desnaturantes e nativas.
• Para Western blot, espera-se uma banda próxima de 68 kDa (glicosilação ou outras modificações podem causar um peso molecular aparente ligeiramente maior); valide com controles positivos e negativos apropriados em condições redutoras.
• Para imuno-histoquímica (IHC) e imunofluorescência (IF), recomenda-se a recuperação de antígeno usando tampão citrato e permeabilização (para IF); a coloração simultânea com um marcador nuclear pode ajudar a confirmar a translocação nuclear do NRF2 após a ativação.
• O anticorpo reage de forma cruzada com o NRF2 de camundongo e rato; verifique o desempenho no tecido ou lisado celular da espécie relevante.
• Para aplicações de ELISA, avalie como anticorpo de captura ou detecção em imunoensaios sanduíche e confirme a especificidade contra proteína recombinante ou extratos celulares.

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