Anticorpo policlonal de coelho anti-NSF para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P46459

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do NSF

• Identidade da proteína: O NSF (proteína de fusão sensível à N-etilmaleimida), também conhecido como ATPase de fusão de vesículas, SKD2 ou SEC18, é membro da família de ATPases AAA, codificado pelo gene NSF (ID do gene: 4905).
• Função principal: Esta proteína é essencial para o transporte mediado por vesículas, catalisando a fusão de vesículas de transporte dentro das cisternas do Golgi e facilitando o transporte do retículo endoplasmático para a pilha do Golgi.
• Entrega de carga: O NSF parece atuar como uma proteína de fusão necessária para entregar proteínas de carga a todos os compartimentos do Golgi, independentemente da origem da vesícula, garantindo o tráfego intracelular adequado.
• Interação com AMPAR: O NSF interage com a subunidade GRIA2 do receptor AMPA, influenciando seu ciclo na membrana e, consequentemente, modulando a plasticidade sináptica (por similaridade).
• Localização subcelular: A proteína reside predominantemente no citoplasma, em conformidade com seu papel nos eventos de fusão de membranas.
• Propriedades principais e associações com doenças: O NSF apresenta atividade de ligação ao ATP e de hidrolase, requer magnésio como cofator e sofre fosforilação e acetilação. Mutações no NSF estão associadas à encefalopatia do desenvolvimento e epiléptica (DEE96) e à deficiência intelectual.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Projeto do imunógeno: O anticorpo foi produzido contra um fragmento recombinante que abrange os aminoácidos 251-400 do NSF humano, uma região dentro do domínio ATPase D2. Isso proporciona especificidade para a proteína nativa.
• Western blotting: Para WB, pode-se esperar uma banda em torno de 83 kDa correspondente ao NSF endógeno. Otimize as condições de bloqueio e detecção para o tipo de amostra utilizado (lisados humanos, de camundongo ou de rato).
• Imunofluorescência/Imunocitoquímica: Em IF/ICC, o NSF deve apresentar marcação citoplasmática. É necessária a permeabilização; utilize métodos de fixação apropriados para preservar os epítopos.
• Imunoprecipitação: A natureza policlonal permite a captura eficiente de complexos nativos de NSF. Valide a eficiência da IP em seu sistema e considere a reticulação, se necessário.
• ELISA: O anticorpo pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção; realize titulações em matriz para determinar as concentrações ideais de revestimento e detecção.
• Considerações gerais: Como anticorpo policlonal de coelho, ele reconhece múltiplos epítopos, reduzindo o risco de perda de sinal devido ao mascaramento de um único epítopo. Inclua sempre controles positivos e negativos específicos para suas condições experimentais.

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