Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-NUAK1 para WB, ELISA - O60285

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NUAK1

• A NUAK1, também conhecida como ARK5 (proteína quinase relacionada à AMPK 5) ou quinase do onfalocele 1, é uma serina/treonina-proteína quinase pertencente à família NUAK de quinases relacionadas à AMPK.
• Controla a adesão celular ao fosforilar a subunidade alvo da fosfatase de miosina PPP1R12A, que então se liga a proteínas 14-3-3, levando à diminuição da defosforilação da cadeia leve da miosina e à alteração da contratilidade da actomiosina.
• Regula a senescência celular e a ploidia através da fosforilação da LATS1 na Ser-464, afetando sua estabilidade e, consequentemente, a via de sinalização Hippo.
• Participa na resposta ao dano no DNA ao fosforilar a p53/TP53 na Ser-15 e Ser-392, e é recrutada para o promotor de CDKN1A/WAF1 para melhorar a transcrição dependente de p53.
• Media a resposta ao dano no DNA induzido por radiação UV: em complexo com a STK11, fosforila a CDKN1A, promovendo sua degradação para permitir um reparo eficiente do DNA. Referências relacionadas: PMID:25329316
• Suprime a apoptose induzida por Fas ao fosforilar a caspase-6 (CASP6), inibindo sua ativação e subsequente clivagem da CFLAR.
• Localiza-se tanto no núcleo quanto no citoplasma, consistente com seus papéis na regulação da transcrição e na dinâmica do citoesqueleto.
• Altamente expressa no coração e cérebro, com níveis mais baixos no músculo esquelético, rim, ovário, placenta, pulmão e fígado; regulada positivamente em linhagens celulares de câncer colorretal, apoiando seu papel na progressão tumoral.
• Passa por modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e conjugação de ubiquitina; o splicing alternativo gera múltiplos isoformas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 362–661, correspondendo à região C-terminal da NUAK1 humana; esta região pode conter domínios regulatórios, portanto, considere a especificidade do anticorpo em aplicações que requerem reconhecimento da região N-terminal.
• Para western blotting, o peso molecular previsto é de 74 kDa; use condições redutoras e valide com controles positivos apropriados, como linhagens celulares de câncer colorretal onde a NUAK1 é regulada positivamente.
• No ELISA, a detecção indireta pode ser realizada usando o imunógeno recombinante como antígeno de revestimento; confirme a reatividade cruzada com amostras de rato em seu sistema de ensaio, se necessário.
• Sempre faça titulação do anticorpo em sua configuração experimental específica, pois as diluições ideais podem variar com o tipo de amostra e o método de detecção.

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