Anticorpo Policlonal Anti-NUDT16 para WB, ELISA - Q96DE0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NUDT16

• A NUDT16 é uma enzima multifuncional, anotada como enzima de remoção de capuz (decapping) de snoRNA U8, e também conhecida como fosfatase de IDP (IDPase), hidrolase nudix 16 e proteína de ligação a snoRNA U8 H29K.
• Em seu papel como enzima de remoção de capuz de RNA, a NUDT16 catalisa a clivagem dependente de metal da estrutura do capuz do snoRNA U8 e de mRNAs, essencial para a maturação do rRNA e renovação (turnover) do mRNA. Referências relacionadas: PMID:20385596, PMID:26121039
• A enzima também funciona como um sanitizador de nucleotídeos, hidrolisando nucleotídeos de purina não canônicos (IDP, dITP, GDP, dGDP, XDP, ITP, dITP) em suas formas monofosfato, com preferência de substrato IDP > dIDP >> GDP = dGDP > XDP = ITP = dITP, prevenindo assim sua incorporação em ácidos nucleicos. Referências relacionadas: PMID:20385596
• A NUDT16 se localiza em múltiplos compartimentos, incluindo núcleo, nucleoplasma, nucléolo e citoplasma, refletindo suas diversas funções no processamento de RNA e metabolismo de nucleotídeos.
• A proteína é amplamente expressa, com os níveis mais altos em pulmão, rim, glândula adrenal, testículo, coração e cérebro.
• A NUDT16 requer íons metálicos divalentes, como manganês ou cobalto, para atividade catalítica e se liga fortemente a GTP, ITP e XTP.
• Além das estruturas de capuz canônicas, a NUDT16 exibe atividade de remoção de capuz em RNAs com capuz de NAD e FAD, e, segundo relatos, em RNAs com capuz de dpCoA. Referências relacionadas: PMID:32432673

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno tem como alvo os aminoácidos 60–130 dentro do domínio Nudix do NUDT16 humano. Esta região mostra alta conservação entre humano e camundongo, consistente com os dados de reatividade cruzada.
• Para detecção por Western blot, use quantidades moderadas de lisado celular total de linhagens celulares humanas ou de camundongo (ex.: 20–30 µg), e sonda com protocolos quimioluminescentes padrão. Espera-se uma banda próxima a 21 kDa.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode servir como reagente de captura ou detecção. A otimização da concentração de revestimento e do sistema de detecção emparelhado é recomendada.
• Como a NUDT16 é uma proteína de baixa abundância em alguns tipos celulares, o enriquecimento de frações nucleares ou o uso de reagentes de detecção mais sensíveis podem melhorar o sinal.
• Para estudos funcionais, observe que a NUDT16 se liga a RNA e íons metálicos; o anticorpo provavelmente reconhece a NUDT16 total independentemente de seu estado de ligação.

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