Anticorpo Monoclonal Anti-NUDT5 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9UKK9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NUDT5

• O NUDT5 é uma enzima de dupla função: na ausência de difosfato, atua como uma ADP-açúcar pirofosfatase, hidrolisando vários nucleosídeos difosfatos modificados; na presença de difosfato, catalisa a síntese de ATP. Referências relacionadas: PMID:27257257
• Como uma ADP-açúcar pirofosfatase, o NUDT5 hidrolisa substratos como ADP-ribose, ADP-manose, ADP-glicose, 8-oxo-GDP e 8-oxo-dGDP com eficiências similares. Referências relacionadas: PMID:10567213, PMID:10722730, PMID:17052728
• No núcleo, o NUDT5 media a síntese de ATP convertendo ADP-ribose em ATP e ribose 5-fosfato, uma reação dependente de sua desfosforilação na Thr-45. Referências relacionadas: PMID:27257257
• A geração nuclear de ATP pelo NUDT5 é crítica para eventos de remodelação de cromatina que consomem energia. Referências relacionadas: PMID:27257257
• O NUDT5 exibe atividade de decapagem in vitro em RNA com cap de UDP-GlcNAc, clivando a ponte pirofosfato do cap de açúcar. Referências relacionadas: PMID:38716860
• O NUDT5 se liga ao snoRNA U8, mas não o decapa, sugerindo um papel no metabolismo do RNA além de suas atividades enzimáticas.
• A proteína se localiza no núcleo e é amplamente expressa, com os níveis mais altos no fígado.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1–100), espera-se que o anticorpo reconheça o NUDT5 de comprimento total e potencialmente quaisquer isoformas contendo esta região; sempre valide em seu sistema celular ou de tecido.
• Para Western blot, uma diluição inicial de 1:1000 é comumente usada para anticorpos monoclonais, mas a otimização com uma série de diluições é recomendada.
• Na imunofluorescência/ICC, a permeabilização com Triton X-100 ou detergente similar é necessária para acessar o NUDT5 nuclear; a fixação com metanol também pode ajudar a preservar a antigenicidade.
• A pré-adsorção com o peptídeo imunizante pode servir como um controle de especificidade tanto em WB quanto em IF/ICC.
• Reatividade cruzada com camundongo e rato foi relatada; no entanto, o alinhamento de sequência da região N-terminal pode ajudar a prever a reatividade com outras espécies.
• Para ELISA, sugere-se o recobrimento direto do antígeno e titulação do anticorpo; considere o uso de proteína NUDT5 recombinante para curvas padrão.

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