Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-NUMA1 para WB, IHC-P, ELISA - Q14980

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NUMA1

• O NUMA1 (Proteína 1 do Aparelho Mitótico Nuclear), também conhecido como NMP-22 ou NuMA, é uma grande proteína de hélices em bobina (coiled-coil) essencial para a organização do fuso mitótico e segregação cromossômica.
• Ele ancora as extremidades negativas dos microtúbulos nos polos do fuso, o que é crítico para estabelecer e manter a integridade dos polos do fuso. Referências relacionadas: PMID:11956313 PMID:12445386
• O NUMA1 regula a orientação e o alongamento do fuso durante metáfase e anáfase através de um mecanismo dependente de dineína-dinactina, envolvendo interações com as proteínas GPSM2 e G(i) alfa no córtex celular. Referências relacionadas: PMID:22327364 PMID:23027904 PMID:23921553 PMID:24109598 PMID:23870127 PMID:24996901
• Durante a anáfase, o NUMA1 recruta a dineína-dinactina para as regiões corticais polares através da ligação direta ao fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PI(4,5)P2), facilitando o alongamento do fuso e a segregação cromossômica. Referências relacionadas: PMID:24371089 PMID:22327364 PMID:23921553 PMID:24996901
• Além da mitose, o NUMA1 é um constituinte estrutural principal da matriz nuclear, ocupando um grande volume do núcleo interfásico e possivelmente servindo um papel de suporte não mitótico. Referências relacionadas: PMID:10075938
• É necessário para a diferenciação epidérmica e a morfogênese do folículo piloso, indicando papéis no desenvolvimento tecidual.
• A localização subcelular muda dinamicamente entre nucleoplasma, polos do fuso, centrossomos, córtex celular e membrana celular lateral durante o ciclo celular.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, ADP-ribosilação, fosforilação e ubiquitinação; também é uma lipoproteína de ligação a lipídios e glicoproteína.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno encontra-se na região C-terminal (aa 2000–2100) do NUMA1 humano; considere que o anticorpo pode detectar tanto a proteína de comprimento total quanto possíveis fragmentos C-terminais.
• Para Western blotting (WB), note o alto peso molecular (~238 kDa); use géis de baixa porcentagem, tempos de transferência estendidos e confirme que as escadas de proteína estão devidamente resolvidas.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), espere coloração nuclear em células interfásicas e acúmulo nos polos do fuso em células mitóticas; valide com marcadores apropriados do ciclo celular ou culturas sincronizadas.
• A reatividade cruzada é indicada para humano, camundongo e rato; verifique a reatividade na sua espécie alvo e tipo de amostra antes de experimentos críticos.
• Para aplicações de ELISA, otimize as concentrações de revestimento e inclua controles relevantes para garantir a especificidade.

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