Anticorpo Policlonel de Coelho Anti-NUMA1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14980

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NUMA1

• A Proteína 1 do Aparelho Mitótico Nuclear (NUMA1), também conhecida como NuMA, NMP-22 ou antígeno SP-H, é uma grande proteína de superenrolamento de 238 kDa codificada pelo gene NUMA1. É um componente principal da matriz nuclear.
• NUMA1 desempenha um papel crítico na formação e manutenção dos polos do fuso durante a mitose, ao ligar as extremidades negativas dos microtúbulos, garantindo assim o alinhamento e a segregação corretos dos cromossomos.
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• Ela atua na orientação e no alongamento do fuso mitótico por meio de mecanismos dependentes de dineína-dinatina, interagindo com complexos corticais que contêm GPSM2 e proteínas Gα, além de fosfoinositídios como o PI(4,5)P2.
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• NUMA1 também é necessária para a montagem do aster de microtúbulos mitóticos e a formação do fuso anastral, regulando positivamente a localização da TNKS nos polos do fuso.
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• Além da mitose, NUMA1 é uma proteína da matriz nuclear altamente abundante que ocupa a maior parte do volume nuclear, o que sugere um papel estrutural. É essencial para a diferenciação epidérmica e a morfogênese do folículo piloso.
• A localização subcelular inclui o núcleo, nucleoplasma, matriz nuclear, polos do fuso, centrossomos, córtex celular e membrana celular lateral, refletindo seus papéis dinâmicos tanto na interfase quanto na mitose.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, ADP-ribosilação, fosforilação e ubiquitinação, conforme anotado no UniProt (ligação isopeptídica, conjugação Ubl, glicoproteína, lipoproteína), que podem regular suas funções.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Devido ao grande peso molecular da NUMA1 (aproximadamente 238 kDa), para Western blotting, considere o uso de um gel de poliacrilamida de baixa porcentagem (ex.: 6 a 8%) e tempos de transferência estendidos para garantir uma transferência eficiente.
• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1 a 309) da NUMA1 humana; verifique se essa região não está ocluída por modificações pós-traducionais ou parceiros de ligação nas suas amostras.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), NUMA1 apresenta localização nuclear em células em interfase e localização nos polos do fuso em células em mitose; otimize as condições de fixação e permeabilização para preservar a antigenicidade.
• Na imuno-histoquímica (IHC), métodos de recuperação de antígeno podem ser necessários para tecidos fixados em formalina e embebidos em parafina; valide os padrões de coloração de acordo com as localizações subcelulares conhecidas.
• Como se trata de um anticorpo policlonal, pode ocorrer variabilidade entre lotes; inclua controles positivos e negativos adequados em cada experimento.

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