Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-OGG1 para WB, IHC-P, ELISA - O15527

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do OGG1

• OGG1 (N-glicosilase/DNA liase) é uma enzima de reparo do DNA com atividade dupla que remove lesões de 8-oxoguanina (8-oxoG) e 2,6-diamino-4-hidroxi-5-N-metilformamidopirimidina (FAPY) causadas por espécies reativas de oxigênio.
• A enzima catalisa a excisão de bases danificadas por meio de sua atividade glicosilase, seguida de uma reação de beta-liase que cliva a cadeia do DNA na posição 3' do sítio apurínico/apirimídico.
• Codificada pelo gene OGG1 (também conhecido como MMH, MUTM, OGH1), múltiplas isoformas são produzidas por splicing alternativo.
• OGG1 se localiza predominantemente no núcleo (incluindo nucleoplasma, speckles e matriz nuclear), mas também é encontrado nas mitocôndrias, refletindo seu papel na manutenção do genoma tanto nuclear quanto mitocondrial.
• É expressa ubiquitousamente em todos os tecidos humanos, o que é consistente com seu papel fundamental na proteção contra danos oxidativos no DNA.
• Como enzima multifuncional, OGG1 pertence à família de DNA glicosilase/AP liase e é essencial para a via de reparo por excisão de bases (BER).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região dentro dos aminoácidos 246–345 do OGG1 humano. Com base na homologia de sequência, o anticorpo pode reagir com múltiplas isoformas splicing; confirme o tamanho esperado da banda (~39 kDa previsto) na sua espécie alvo usando Western blot.
• Para WB, recomendamos testar o anticorpo em diluições padrão (ex.: 1:500–1:2000) com controles de carregamento adequados, usando lisados de linhas celulares humanas ou de rato como material positivo.
• Em IHC-P, otimize os métodos de recuperação de antígeno (recuperação de epitopo induzida por calor, pH 6 ou 9) e garanta permeabilização nuclear completa. Inclua controles de isotipo e controles de absorção com o peptídeo imunógeno para verificar a especificidade.
• Para ELISA, o anticorpo pode servir como reagente de detecção ou de captura; o pareamento com outro anticorpo anti-OGG1 (ex.: policlonal) pode melhorar a sensibilidade. Realize titulações em tabuleiro de xadrez para determinar as concentrações ideais.
• Como OGG1 é uma proteína de baixa abundância em alguns tecidos, considere enriquecer frações nucleares ou mitocondriais antes da análise.

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