Anticorpo Monoclonal Anti-OGT para WB, ELISA, ChIP - O15294

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da OGT

• A OGT (subunidade 110 kDa da UDP-N-acetilglicosamina--peptídeo N-acetilglicosaminiltransferase) é a subunidade catalítica do complexo O-GlcNAc transferase, responsável por adicionar um único N-acetilglicosamina (O-GlcNAc) aos resíduos de serina/treonina de proteínas nucleares e citoplasmáticas (PubMed:12150998, PubMed:15361863, PubMed:19451179). Referências relacionadas: PMID:12150998, PMID:15361863, PMID:19451179
• Glicosila uma vasta gama de substratos, incluindo histona H2B, AKT1, AMPK, EZH2, MAPT/TAU e muitos outros, regulando assim processos-chave como transcrição, sinalização da insulina, autofagia e ritmos circadianos (PubMed:19451179, PubMed:20200153, PubMed:21285374). Referências relacionadas: PMID:19451179, PMID:20200153, PMID:21285374
• A OGT existe em múltiplas isoformas, incluindo uma isoforma mitocondrial (mOGT) que é citotóxica e promove a apoptose, particularmente em células de insulinoma. Também possui uma atividade especializada de N-acetilglicosaminiltransferase com preferência distinta de substrato (PubMed:31527085). Referências relacionadas: PMID:31527085
• A enzima localiza-se no núcleo, citoplasma, mitocôndrias e membrana celular, refletindo seus diversos papéis funcionais.
• Modificações pós-traducionais da OGT incluem acetilação e fosforilação, e ela participa de vias de conjugação de ubiquitina. Palavras-chave também destacam seu envolvimento em apoptose, ritmos biológicos, regulação da cromatina e interações hospedeiro-vírus.
• A OGT é altamente expressa no pâncreas, com níveis moderados no músculo esquelético, coração, cérebro e placenta, e quantidades vestigiais no pulmão e fígado, alinhando-se com seu papel na sinalização da insulina e homeostase da glicose.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O peptídeo imunógeno corresponde aos resíduos 947–1046 da OGT humana, uma região provavelmente exposta na proteína nativa; considere o uso deste anticorpo para Western blot desnaturante, onde o epítopo está acessível.
• Para ensaios de ChIP, valide as condições de reticulação (cross-linking) e a especificidade do anticorpo com controles positivos e negativos apropriados, dada a associação da OGT com a cromatina.
• No Western blot, o peso molecular previsto é de ~117 kDa; no entanto, múltiplas isoformas e extensas modificações pós-traducionais podem resultar em bandas adicionais ou deslocamentos; inclua marcadores de peso molecular adequados.
• Ao trabalhar com amostras de roedores, confirme a reatividade em tecidos de camundongo ou rato, pois o anticorpo apresenta reatividade cruzada; recomenda-se a otimização da diluição e das condições de bloqueio.

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