Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Oorexina B/Hipocretina-2 para WB, ELISA - O43612

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Oorexina B/Hipocretina-2

• O precursor da neuropeptida hipocretina (pré-pró-orexina) é processado em duas neuropeptidas maduras: oorexina-A (hipocretina-1) e oorexina-B (hipocretina-2), que partilham homologia de sequência, mas têm perfis de ligação ao recetor distintos.
• A oorexina-B/Hipocretina-2 liga-se especificamente ao recetor de oorexina HCRTR2/OX2R e desempenha papéis-chave na regulação central do comportamento alimentar, da homeostase energética e dos ciclos sono-vigília.
• Os neurónios orexinérgicos localizam-se principalmente no hipotálamo lateral; ao nível subcelular, o precursor localiza-se no retículo endoplasmático rugoso, vesículas citoplasmáticas e sinapses.
• A oorexina-B/Hipocretina-2 está envolvida na modulação da secreção da hormona luteinizante da hipófise de forma dependente de esteroides ovarianos, sugerindo um papel na função reprodutiva neuroendócrina.
• O precursor contém um peptídeo sinal, sofre clivagem em pares de resíduos básicos e apresenta modificações pós-traducionais, incluindo amidação e formação de ácido pirrolidona carboxílico, que são críticas para a bioatividade.
• É detetada uma expressão abundante no núcleo subtalâmico, enquanto outras regiões cerebrais e tecidos periféricos não mostram expressão detetável (o hipotálamo não foi testado).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo sintético da região N-terminal (aa 1-100) da oorexina B/Hipocretina-2 humana. O anticorpo pode reconhecer tanto o precursor como o peptídeo maduro, dependendo da preparação e processamento da amostra.
• Para o Western blot (WB), considere o peso molecular previsto do precursor de ~13 kDa e o peptídeo maduro de oorexina-B menor; valide a deteção usando controlos positivos relevantes, como lisados de tecido cerebral ou proteína recombinante.
• No ELISA, avalie o revestimento direto com peptídeo ou formatos sanduíche; avalie a potencial reatividade cruzada com a oorexina-A devido à semelhança de sequência dentro da região do imunogénio.
• Inclua controlos positivos e negativos apropriados e otimize os fatores de diluição empiricamente para cada aplicação.

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