Anticorpo Policlnonal Anti-OTUB1 para WB, ELISA - Q96FW1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da OTUB1

• OTUB1 é uma ubiquitin tioesterase que cliva especificamente cadeias de poliubiquitina ligadas a Lys-48 das proteínas, com atividade muito menor contra NEDD8; não cliva diubiquitina (PubMed:12401499, 12704427, 14661020, 18954305, 23827681). Referências relacionadas: PMID:12401499 PMID:12704427 PMID:14661020 PMID:18954305 PMID:23827681
• Regula a anergia de linfócitos T ao interagir com RNF128/GRAIL: a isoforma 1 desestabiliza RNF128 para evitar a anergia, enquanto a isoforma 2 estabiliza RNF128 e promove a anergia (PubMed:14661020). Referências relacionadas: PMID:14661020
• OTUB1 desempenha um papel não catalítico no reparo de DNA ao inibir a ligase E3 RNF168 através da ligação a UBE2N/UBC13, limitando a propagação das marcas de ubiquitinação de histonas ligadas a Lys-63 nos locais de dano; essa inibição é regulada alostericamente pela ubiquitina livre (PubMed:20725033, 22325355). Referências relacionadas: PMID:20725033 PMID:22325355
• Regula os complexos mTORC1 e mTORC2 via deubiquitinação não catalítica de RPTOR (quando fosforilado em Tyr-26) e DEPTOR (PubMed:29382726, 35927303). Referências relacionadas: PMID:29382726 PMID:35927303
• Deubiquitina o receptor alfa de estrogênio (ESR1) (PubMed:19383985). Referências relacionadas: PMID:19383985
• Localização subcelular: principalmente citoplasmática.
• A isoforma 1 é expressa de forma ubíqua, enquanto a isoforma 2 é restrita a tecidos linfoides (tonsilas, linfonodos, baço, células mononucleares do sangue periférico).
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação (ex: Tyr-26) e acetilação, e a proteína está implicada em processos como resposta ao dano de DNA, imunidade adaptativa e atividade de tiol protease.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 50–150 do OTUB1 humano, uma região presente em ambas as isoformas; considere isso ao interpretar resultados em amostras linfoides vs. não linfoides.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 31 kDa. Otimize o bloqueio e a diluição do anticorpo para o seu tipo específico de amostra.
• Para ELISA, tanto os formatos direto quanto de captura podem ser adequados; valide as condições de revestimento e detecção com proteína purificada ou lisados.
• O anticorpo tem reação cruzada com a OTUB1 de camundongo, portanto pode ser usado em modelos murinos, mas verifique a especificidade no seu sistema experimental.
• Considere o contexto funcional: OTUB1 está envolvida na deubiquitinação, reparo de DNA e sinalização mTOR, portanto controles apropriados (ex: status de ubiquitinação, indução de dano de DNA) podem ser necessários.

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