Anticorpo Policloonal de Coelho Anti-OTUD4 para WB, IF/ICC, ELISA - Q01804

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de OTUD4

• OTUD4, também conhecida como proteína HIN-1 induzida pelo HIV-1, é uma desubiquitinase que hidrolisa a ligação isopeptídica entre a ubiquitina e os resíduos de lisina nas proteínas alvo (PubMed:23827681, PubMed:25944111, PubMed:29395066).
  Referências relacionadas: PMID:23827681 PMID:25944111 PMID:29395066
• Após fosforilação em Ser-202 e Ser-204, OTUD4 desubiquitina especificamente a proteína adaptadora MYD88 poliubiquitinada em Lys-63 através das vias do receptor de IL-1 e do receptor Toll-like, atenuando a transcrição inflamatória dependente de NF-kB (PubMed:29395066).
  Referências relacionadas: PMID:29395066
• Independentemente de sua atividade catalítica, OTUD4 atua como um andaime para montar as desubiquitinases USP7 e USP9X, estabilizando a enzima de reparo de alquilação ALKBH3 e promovendo o reparo de lesões alquiladas no DNA (PubMed:25944111).
  Referências relacionadas: PMID:25944111
• A proteína se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo, o que é consistente com seus papéis na sinalização imune e no reparo de DNA.
• OTUD4 sofre modificações pós-traducionais incluindo fosforilação (pelo menos em Ser-202/Ser-204) e acetilação, e está sujeita a splicing alternativo.
• A proteína de comprimento total tem um peso molecular calculado de aproximadamente 124 kDa (UniProt Q01804).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 200-500 de OTUD4 humana, uma região central que pode detectar OTUD4 endógena em múltiplos formatos de aplicação.
• Para Western blotting, a proteína OTUD4 de comprimento total migra a aproximadamente 124 kDa; recomenda-se um gel de SDS-PAGE de 6-8% e condições de transferência adequadas.
• Para imunofluorescência/ICC, OTUD4 exibe localização tanto citoplasmática quanto nuclear; as condições de permeabilização devem ser otimizadas para detectar as populações nucleares.
• Experimentos de ELISA podem ser realizados usando o imunógeno recombinante ou lisados celulares; considere a validação com um controle positivo conhecido.
• A reatividade cruzada é esperada com OTUD4 de humano, camundongo e rato com base na homologia de sequência; no entanto, o desempenho em cada espécie deve ser confirmado experimentalmente.
• Como um anticorpo policloonal, a consistência entre lotes deve ser verificada, e é aconselhável incluir controles positivos e negativos adequados em todos os ensaios.

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