Anticorpo policlonal de coelho anti-OX40L para WB, IF/ICC, ELISA - P23510

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de OX40L (TNFSF4)

• OX40L, também conhecido como TNFSF4, CD252 e glicoproteína Gp34, é membro da superfamília de ligantes do fator de necrose tumoral (TNF), funcionando como uma molécula coestimuladora essencial nas respostas imunes.
• Codifica uma proteína transmembrana do tipo II expressa principalmente em células apresentadoras de antígenos (APCs) ativadas, incluindo células B, células dendríticas e macrófagos.
• OX40L liga-se especificamente ao seu receptor, TNFRSF4 (OX40), presente nas células T ativadas, desencadeando sinais coestimuladores que aumentam a proliferação, a sobrevivência e a produção de citocinas efetoras das células T.
• A proteína está localizada na membrana celular por meio de uma sequência sinalizadora de ancoragem N-terminal, com o domínio de homologia ao TNF C-terminal voltado para o espaço extracelular, possibilitando a trimerização e a interação com o receptor.
• Modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação e formação de pontes dissulfeto, são essenciais para a estabilidade estrutural e a bioatividade.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e polimorfismos genéticos no gene TNFSF4 foram associados à suscetibilidade ao lúpus eritematoso sistêmico (LES) e a outros distúrbios autoimunes.
• O domínio extracelular (aproximadamente os aminoácidos 51-183) utilizado para a imunização corresponde à região de ligação ao receptor, garantindo que o anticorpo tenha como alvo a parte funcional da molécula.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange o domínio extracelular previsto (aa 51-183); portanto, o anticorpo deve reconhecer tanto a forma ligada à membrana quanto quaisquer fragmentos solúveis liberados de OX40L.
• Para Western blotting, o peso molecular teórico é de aproximadamente 21 kDa; no entanto, a glicosilação pode causar uma alteração na migração. Recomenda-se utilizar condições redutoras; valide com controles positivos apropriados.
• Na imunofluorescência/ICC, os protocolos de fixação e permeabilização podem precisar de otimização, pois o epítopo é extracelular, mas pode ser afetado pela reticulação. Teste condições permeabilizadas e não permeabilizadas.
• A reatividade cruzada relatada com OX40L de camundongo permite o uso em modelos murinos; verifique o desempenho no seu sistema experimental específico.
• Para aplicações de ELISA, considere combinar este anticorpo policlonal com um parceiro adequado de captura/detecção para construir um ensaio sanduíche robusto.

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