Anticorpo monoclonal de coelho anti-p150 CAF1 para WB, ELISA - Q13111

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de p150 CAF1 (CHAF1A)

• p150 CAF1, também conhecido como subunidade A do fator 1 de montagem da cromatina (CHAF1A), é um componente essencial do complexo do fator 1 de montagem da cromatina (CAF-1).
• O CAF-1 atua como um chaperona de histonas, facilitando a deposição das histonas H3 e H4 recém-sintetizadas sobre o DNA em replicação durante a fase S, uma etapa crítica na montagem dos nucleossomos.
• O CAF-1 também atua durante a reparação do DNA, garantindo a restauração adequada da estrutura da cromatina após danos no DNA.
• A proteína desempenha um papel na manutenção da heterocromatina em células proliferativas, direcionando proteínas CBX recém-sintetizadas para focos de replicação heterocromáticos.
• CHAF1A está localizada exclusivamente no núcleo, em consonância com o seu papel na replicação do DNA e na dinâmica da cromatina.
• As modificações pós-traducionais incluem a fosforilação, e a proteína está sujeita a splicing alternativo e ubiquitinação, conforme destacado pelas palavras-chave do UniProt.
• O peso molecular previsto é de aproximadamente 107 kDa (106.910 Da), consistente com o peso proteico observado de cerca de 107 kDa.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para Western blot (WB), recomenda-se uma condição de desnaturação reduzida, considerando o peso molecular previsto de aproximadamente 107 kDa; devem ser incluídos lisados de controlo positivo adequados de linhagens celulares humanas (por exemplo, HeLa, HEK293).
• O imunógeno (um peptídeo sintético localizado entre os aminoácidos 100–200) pode influenciar o desempenho do anticorpo; considere realizar um ensaio de competição com peptídeo para confirmar a especificidade.
• Para ELISA, otimize as condições de revestimento e bloqueio utilizando p150 CAF1 recombinante purificado ou lisados celulares; a reatividade específica para humanos deve ser validada.
• Como a expressão de CAF-1 depende do ciclo celular, considere sincronizar as células para enriquecer a fase S durante a realização dos ensaios.

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