Anticorpo Policloonal Anti-p38 MAPK para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q16539

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p38 MAPK

• A proteína quinase 14 ativada por mitógenos (MAPK14), comumente conhecida como p38 alfa, é uma serina/treonina quinase ativada por estresse que pertence à família das quinases MAP. Ela existe como múltiplas isoformas, incluindo EXIP e MXI2, geradas por splicing alternativo.

• Após ativação por sinais extracelulares, como citocinas pró-inflamatórias ou estresse físico, a p38 fosforila as quinases downstream MSK1/2, que então regulam fatores de transcrição (CREB1, NF-κB, STATs) e a histona H3 (PubMed:9687510, PubMed:9792677). Ela também ativa MK2/3 para controlar a estabilidade do mRNA via ZFP36 e ELAVL1, e MNK1/2 para fosforilar EIF4E2 para o início da tradução (PubMed:11154262). Referências relacionadas: PMID:9687510 PMID:9792677 PMID:11154262

• A p38 regula a renovação proteica ao fosforilar a ubiquitina ligase SIAH2 (PubMed:17003045) e o inibidor de apoptose CFLAR, e pode inibir a autofagia ao interferir no tráfego de ATG9 (PubMed:19893488). Referências relacionadas: PMID:17003045 PMID:19893488

• Na dinâmica de receptores, a p38 impulsiona a internalização do EGFR mediada por clatrina via fosforilação do próprio EGFR e de efetores RAB5A (PubMed:16932740), e promove a clivagem do ectodomínio de ligantes da família TGF-α ao ativar a metaloprotease ADAM17 (PubMed:20188673). Referências relacionadas: PMID:16932740 PMID:20188673

• A p38 nuclear fosforila diretamente fatores de transcrição incluindo ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, TP53/p53 e MEF2A/C (PubMed:10330143, PubMed:9430721, PubMed:9858528), e aumenta a acessibilidade do NF-κB nos promotores de genes inflamatórios ao aumentar a fosforilação da histona H3 na Ser-10. Referências relacionadas: PMID:10330143 PMID:9430721 PMID:9858528

• A p38 contribui para a regulação do ciclo celular ao fosforilar CDC25B/C, levando a um atraso na fase G2 após radiação ultravioleta (PubMed:11333986). Ela também é essencial para a eritropoiese desenvolvimento e induzida por estresse através da regulação da expressão do gene EPO (PubMed:10943842). Referências relacionadas: PMID:11333986 PMID:10943842

• Durante a infecção, a proteína EsxA de M. tuberculosis pode ativar a p38 em células T, resultando na inibição da produção de IFN-γ (PubMed:21586573). Referências relacionadas: PMID:21586573

• A p38 se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo. Ela é amplamente expressa, com níveis mais altos no cérebro, coração, placenta, pâncreas e músculo esquelético, e níveis mais baixos no pulmão, fígado e rim. As modificações pós-traducionais incluem acetilação e ubiquitinação, e ela é identificada em estudos de proteômica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 261–360 da p38 humana) é conservado entre humano, camundongo e rato, o que é consistente com a reatividade cruzada do anticorpo. Verifique por alinhamento de sequência antes de expandir para outras espécies.
• Para Western blotting, use condições redutoras desnaturantes e uma faixa de diluição inicial do anticorpo de 1:500–1:2000; otimize com controles positivos adequados (ex.: HeLa, Jurkat).
• Para IHC-P, a recuperação de antígeno (ex.: tampão de citrato, pH 6,0) pode ser necessária; valide a especificidade da coloração com peptídeo de bloqueio ou controles de tecido knockout.
• Para IF/ICC, fixe com PFA a 4% e permeabilize com 0,1% de Triton X-100; faça co-coloração com marcadores nucleares/citoplasmáticos.
• Para IP, use 1–2 µg de anticorpo por 500 µg de lisado proteico e capture com esferas de Proteína A/G.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; teste o pareamento com um anticorpo monoclonal compatível.

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