Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-p38 MAPK para WB, IF/ICC, ELISA - Q16539

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 é uma quinase serina/treonina que serve como um componente central da via da quinase MAP p38. Ativada por citocinas pró-inflamatórias e vários estressores, ela regula uma extensa rede de substratos a jusante (estimados 200–300 alvos) para controlar diversos processos celulares, incluindo expressão gênica, estabilidade de mRNA, tradução e renovação proteica.
• Através da fosforilação das quinases a jusante MSK1/2 e MAPKAPK2/3/MNK1/2, a MAPK14 orquestra a regulação transcricional e pós‑transcricional. MSK1/2 ativam fatores de transcrição (CREB1, ATF1, NF‑κB, STAT1/3) e fosforilam diretamente a histona H3 e HMGN1 para promover a remodelação da cromatina e a indução de genes imediatos‑precoces. MAPKAPK2/3 controlam a estabilidade do mRNA via ZFP36 e ELAVL1, enquanto MNK1/2 modulam a tradução através da fosforilação de eIF4E2. Referências relacionadas: PMID:9687510, PMID:9792677, PMID:11154262
• MAPK14 fosforila diretamente uma série de fatores de transcrição, incluindo TP53/p53 (em cooperação com a caseína quinase II), ATF1, ATF2, ELK1 e MEF2C/MEF2A, ligando sinais de estresse à reprogramação transcricional. Referências relacionadas: PMID:10747897, PMID:10330143, PMID:9430721, PMID:9858528
• A quinase regula a degradação proteica e a dinâmica dos receptores de membrana. Ela fosforila CFLAR para promover a degradação proteassomal, controla a atividade da ligase de ubiquitina SIAH2 e interfere no tráfego de ATG9 para modular a autofagia. Além disso, MAPK14 fosforila efetores de EGFR e RAB5A para regular a endocitose mediada por clatrina, e ativa o desprendimento do ectodomínio dirigido por ADAM17 dos ligantes do EGFR. Referências relacionadas: PMID:17003045, PMID:19893488, PMID:16932740, PMID:20188673
• MAPK14 participa em pontos de verificação do ciclo celular e respostas a danos no DNA. Ela fosforila CDC25B e CDC25C, permitindo a ligação de 14‑3‑3 e iniciando um atraso na fase G2 após radiação UV. Após danos no DNA, fosforila TIAR, que libera TIAR do mRNA de GADD45A e previne a degradação do transcrito. Referências relacionadas: PMID:11333986, PMID:20932473
• Essencial para o crescimento dos vasos sanguíneos do labirinto placentário e para a eritropoiese induzida por estresse através da regulação da expressão do gene EPO. MAPK14 também desencadeia a ativação do inflamassoma NLRP1 a jusante de colisões ribossômicas, levando à piroptose. Adicionalmente, durante a infecção por M. tuberculosis, a EsxA bacteriana fosforila MAPK14 para suprimir a produção de IFN‑γ em células T. Referências relacionadas: PMID:10943842, PMID:35857590, PMID:21586573
• MAPK14 é expressa numa ampla gama de tecidos, com os níveis mais altos no cérebro, coração, placenta, pâncreas e músculo esquelético; expressão mais baixa é observada no pulmão, fígado e rim. Localiza-se tanto no citoplasma quanto no núcleo. O splicing alternativo produz isoformas como MXI2 (atividade quinase reduzida) e EXIP (pró‑apoptótica). A proteína sofre múltiplas modificações pós‑traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e conjugação semelhante à ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (peptídeo sintético mapeado para os aminoácidos 100‑200) encontra-se numa região conservada; portanto, é esperada reatividade cruzada com MAPK14 de rato e rato. Valide a reatividade em lisados de células ou tecidos específicos da espécie relevante antes do uso rotineiro.
• Para western blot, considere usar extratos celulares totais de células estressadas vs. em repouso para observar mudanças de banda fosfo-específicas. Sempre inclua controles apropriados (por exemplo, anticorpos fosfo-p38, inibidores de quinase) para garantir a especificidade do sinal.
• Na imunofluorescência/ICC, otimize as condições de fixação/permeabilização e confirme padrões de coloração consistentes com a distribuição citoplasmática e nuclear. A co-coloração com marcadores de compartimento é recomendada.
• Para ELISA, use a proteína MAPK14 humana recombinante como padrão e valide a linearidade da detecção. Emparelhe este anticorpo com um anticorpo de detecção adequado para desenvolver um ELISA sanduíche sensível.
• Como a MAPK14 exibe funções independentes de quinase e múltiplas isoformas, verifique se a sua leitura experimental reflete o papel específico que pretende estudar.

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