Anticorpo Policlonal Anti-p47phox/NCF1 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P14598

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p47phox/NCF1

• Também conhecido como Fator 1 do citosol de neutrófilos, NCF-47K, Organizador de Nox 2 (NOXO2) e p47-phox. É uma subunidade do complexo NADPH oxidase fagocitária.
• Como parte do complexo NADPH oxidase, medeia a transferência de elétrons do NADPH para O2 para produzir ânion superóxido (PubMed:2547247, PubMed:2550933, PubMed:38355798). Esta geração de superóxido é crítica para a atividade microbicida dos fagócitos. Referências relacionadas: PMID:2547247, PMID:2550933, PMID:38355798
• A ativação da oxidase envolve a ligação dependente de fosforilação da NCF1 ao C-terminal da CYBA/p22-phox, promovendo a translocação das subunidades citosólicas para a membrana (PubMed:12732142, PubMed:19801500). Referências relacionadas: PMID:12732142, PMID:19801500
• A proteína contém domínios SH3 e PX, que estão envolvidos em interações proteína-proteína e lipídicas, facilitando a montagem do complexo.
• A localização subcelular inclui citoplasma, citosol e membrana; é principalmente citosólica e transloca para a membrana após ativação.
• Especificidade tecidual: Detectada em monócitos de sangue periférico e neutrófilos ao nível proteico.
• Palavras-chave destacam sua associação com a doença granulomatosa crônica (DGC), splicing alternativo, fosfoproteína e domínio SH3.
• Desempenha um papel na defesa do hospedeiro, com mutações ligadas à DGC, uma imunodeficiência caracterizada por infecções recorrentes.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 1-390, cobrindo toda a sequência proteica. Isso pode permitir a detecção de múltiplos isoformas, se presentes.
• Para Western blot, o peso molecular esperado é de aproximadamente 45 kDa; considere verificar em lisados relevantes de monócitos/neutrófilos humanos, de camundongo ou rato.
• Para imunofluorescência, a permeabilização pode ser necessária para detectar p47phox citosólica; valide o sinal em fagócitos ativados versus em repouso.
• Na imunoprecipitação, o anticorpo pode co-precipitar outros componentes do complexo NADPH oxidase; confirme com controles apropriados.
• Para ELISA, teste o anticorpo como reagente de captura ou detecção em um ensaio sanduíche; otimize as concentrações e valide com padrões conhecidos.

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