Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-p47phox/NCF1 para WB, ELISA - P14598

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do p47phox/NCF1

• O p47phox (fator citosólico de neutrófilos 1) é codificado pelo gene NCF1 (também conhecido como NOXO2, SH3PXD1A) e é uma proteína citosólica de 47 kDa; o splicing alternativo foi relatado, mas não totalmente caracterizado.
• Como subunidade do complexo da oxidase de NADPH dos fagócitos, o p47phox permite a transferência de eletrões do NADPH citosólico para o O2 para produzir o anião superóxido (O2(-)). Referências relacionadas: PMID:2547247, PMID:2550933, PMID:38355798
• A ativação envolve a ligação dependente de fosforilação do p47phox ao terminal C do CYBA/p22-phox, iniciando a montagem das subunidades citosólicas com o complexo de membrana central. Referências relacionadas: PMID:12732142, PMID:19801500
• O p47phox localiza-se principalmente no citoplasma e citosol, e transloca para a membrana após ativação.
• Detetado ao nível da proteína em monócitos e neutrófilos do sangue periférico.
• As características incluem domínios SH3, um domínio PX para ligação de lípidos e locais de fosforilação, consistentes com o seu papel regulador.
• Defeitos no NCF1 estão associados à doença granulomatosa crónica autossómica recessiva (CGD), caracterizada por morte fagocítica prejudicada.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde aos resíduos 291–390 do p47phox humano; se for observada reatividade cruzada com outras espécies, considere validar a deteção nesses sistemas.
• Para o Western blot, espera-se uma banda aproximadamente a 45 kDa; inclua marcadores de peso molecular apropriados e controlos de carregamento.
• Valide o anticorpo em tipos de amostras fisiologicamente relevantes, como monócitos ou neutrófilos do sangue periférico humano.
• Para aplicações de ELISA, otimize a diluição do anticorpo e considere condições de bloqueio e lavagem apropriadas para uma deteção de sinal robusta.
• Ao detetar formas fosforiladas, note que a fosforilação dependente da ativação pode afetar o desvio da banda ou a intensidade do sinal.

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