Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-P4HA1 para WB, IF/ICC, ELISA - P13674

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da P4HA1

• A subunidade alfa-1 da prolil 4-hidroxilase (P4HA1), também conhecida como subunidade alfa-1 do complexo procollagena-prolina, 2-oxoglutarato-4-dioxigenase, é uma subunidade catalítica do complexo enzimático colágeno prolil 4-hidroxilase.
• Ela catalisa a formação pós-traducional de 4-hidroxiprolina em sequências -Xaa-Pro-Gly- em colágenos e outras proteínas, etapa essencial para a estabilidade da tripla hélice do colágeno.
• A P4HA1 se localiza no lúmen do retículo endoplasmático, onde modifica as cadeias nascentes de procollágeno durante a biossíntese.
• A proteína é expressa em múltiplos tecidos, incluindo coração, fígado, músculo esquelético, rim, placenta, pulmão e pâncreas.
• Como dioxigenase, a P4HA1 requer ferro e vitamina C como cofatores e é um membro da família das oxigenases dependentes de 2-oxoglutarato.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação, e o gene sofre splicing alternativo, podendo gerar múltiplas isoformas.
• Palavras-chave: Estrutura 3D, Splicing alternativo, Dioxigenase, Retículo endoplasmático, Glicoproteína, Ferro, Ligação a metal, Oxidoredutase, Identificação proteômica, Proteoma de referência, Sinal, Repetição TPR, Vitamina C.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que compreende os aminoácidos 235-534 da P4HA1 humana. A especificidade do anticorpo pode ser confirmada por ELISA de competição com peptídeo ou Western blot usando proteína P4HA1 recombinante.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de ~61 kDa; valide com lisados de controle positivo de linhagens celulares de humano, camundongo ou rato que expressem P4HA1.
• Em imunofluorescência/ICC, espera-se que a P4HA1 se localize no retículo endoplasmático; use co-marcação apropriada (ex.: marcadores de RE) para confirmação.
• Para ELISA, considere um formato direto ou sanduíche e titule o anticorpo para obter o sinal ideal com o peptídeo imunizante ou a proteína de comprimento total.
• O desempenho do anticorpo pode variar conforme a aplicação; estudos piloto com controles positivos/negativos conhecidos são recomendados.

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