Anticorpo Policloonal de Coelho Anti-P4HA3 para WB, IF/ICC, ELISA - Q7Z4N8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da P4HA3

• P4HA3 (prolyl 4-hidroxilase subunidade alfa-3) é uma enzima essencial para a biossíntese do colágeno, catalisando a formação de 4-hidroxiprolina nos motivos -Xaa-Pro-Gly-.
• Essa modificação pós-traducional é fundamental para a estabilidade térmica da tripla hélice do colágeno e a montagem adequada da matriz extracelular.
• Múltiplas isoformas são geradas por splicing alternativo, e a proteína apresenta um peptídeo sinal, repetições tetratricopeptídicas (TPR) e um domínio de bobina enrolada.
• Localizada principalmente no lúmen do retículo endoplasmático, onde ocorre o processamento do colágeno.
• Altamente expressa na placenta, fígado e pele fetal; também detectada em capas fibrosas de lesões ateroscleróticas e em níveis mais baixos em outros tecidos.
• Pertence à família P4HA de dioxigenases dependentes de 2-oxoglutarato e ferro; requer vitamina C para sua atividade.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação, e a proteína é conhecida por ligar ferro como cofator.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 20–110) tem como alvo a região N-terminal; realize o alinhamento de sequência para prever a reatividade cruzada em outras espécies.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 61 kDa; valide usando lisados de controle positivo de placenta ou fígado.
• Para IF/ICC, otimize as condições de permeabilização para detectar a proteína residente no lúmen do RE.
• O ELISA pode exigir a titulação tanto do antígeno de revestimento quanto do anticorpo para obter sinal ideal.

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