Anti-P4HB Anticorpo Monoclonal de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - P07237

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do P4HB

• A proteína dissulfeto-isomerase (P4HB) é uma enzima multifuncional e chaperona do retículo endoplasmático, também conhecida como PDI, PDIA1 e subunidade beta da prolil 4-hidroxilase.
• Catalisa a formação, quebra e rearranjo de ligações dissulfeto em proteínas nascentes, garantindo o dobramento adequado das proteínas no lúmen do RE.
• Na superfície celular, atua como uma redutase que cliva ligações dissulfeto de proteínas exofaciais, modulando a estrutura e função das proteínas de superfície celular. Referências relacionadas: PMID:21670307
• Após fosforilação por FAM20C, altas concentrações de P4HB funcionam como uma chaperona inibindo a agregação de proteínas mal dobradas, enquanto baixas concentrações promovem a agregação (atividade anti-chaperona). Referências relacionadas: PMID:32149426
• Serve como subunidade estrutural do complexo prolil 4-hidroxilase e da proteína de transferência de triacilglicerol microsomal MTTP.
• A localização subcelular inclui o lúmen do retículo endoplasmático, melanossomos e a membrana celular; também é secretada para a superfície celular, onde interage com LGALS9.
• Palavras-chave e associações de doenças: mutações no P4HB estão ligadas à craniossinostose e osteogênese imperfeita; modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo C-terminal (aa 409-508) do P4HB humano; a acessibilidade do epítopo pode ser influenciada pelo dobramento da proteína ou interações.
• Para Western blotting (WB), espera-se uma banda em torno de 57 kDa. Use controles de carregamento apropriados e valide a especificidade do anticorpo usando amostras de knockdown ou knockout.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), métodos de recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor em tampão citrato, pH 6,0) podem melhorar o sinal. Otimize a concentração do anticorpo primário e as condições de incubação.
• Para ELISA, considere emparelhar este anticorpo monoclonal com um anticorpo policlonal de captura ou detecção para ensaios sanduíche; valide na matriz de amostra relevante.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada; no entanto, verifique a homologia da sequência da região do imunógeno entre as espécies para confirmar a ligação ao usar amostras não humanas.
• Armazene o anticorpo conforme recomendado (o envio em saco de gelo indica requisito de cadeia de frio); evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.

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