Anticorpo policlonal de coelho anti-P4HB para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P07237

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da P4HB

• P4HB codifica a proteína dissulfeto-isomerase (PDI), uma chaperona e oxidorredutase multifuncional do retículo endoplasmático (RE) que catalisa a formação, quebra e reorganização de ligações dissulfeto em proteínas recém-sintetizadas.
• Também atua como uma redutase da superfície celular, clivando ligações dissulfeto de proteínas exofaciais e modulando o estado redox da membrana plasmática, particularmente em células Th2 por meio da interação com LGALS9. Referências relacionadas: PMID:21670307
• P4HB atua como uma subunidade estrutural de várias enzimas multiméricas, incluindo a prolil 4-hidroxilase (envolvida na síntese de colágeno) e a proteína microssomal de transferência de triacilglicerol (MTTP), destacando seu papel em diversas vias biossintéticas.
• Em altas concentrações e após fosforilação por FAM20C, P4HB atua como uma chaperona para inibir a agregação de proteínas mal dobradas, enquanto em baixas concentrações facilita a agregação, demonstrando atividade anti-chaperona dependente da concentração. Referências relacionadas: PMID:32149426
• A proteína contém um motivo CXXC redox-ativo e dois domínios semelhantes à tiorredoxina, consistentes com suas funções de isomerase e chaperona. Está localizada principalmente no lúmen do RE, mas também é detectada na membrana plasmática e nos melanossomos.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que regulam sua atividade de chaperona. Mutações em P4HB estão associadas a doenças como osteogênese imperfeita e craniossinostose, ressaltando sua relevância clínica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aminoácidos 329–508) da P4HB humana; o anticorpo policlonal resultante pode reconhecer a proteína endógena de comprimento total em várias espécies.
• Para Western blotting, espera-se uma banda principal de aproximadamente 57 kDa em amostras humanas, de camundongo e de rato; considere o uso de condições desnaturantes redutoras.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), valide o anticorpo com tecidos/células de controle positivo e negativo apropriados, pois P4HB é abundantemente expressa no RE.
• O anticorpo também é adequado para ELISA; recomenda-se a titulação e otimização internas para ensaios quantitativos.

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